Question

【題目】圖甲、乙中的箭頭表示三種限制性核酸內切酶的酶切位點，ampr表示氨芐青霉素抗性基因，neo表示新霉素抗性基因．下列敘述正確的是

A. 圖甲中的質粒用BamHⅠ切割后，含有4個游離的磷酸基團

B. 在構建重組質粒時，可用PstⅠ和BamHⅠ切割質粒和外源DNA

C. 用PstⅠ和HindⅢ酶切，可以保證重組DNA序列的唯一性

D. 導入目的基因的大腸桿菌可在含氨芐青霉素的培養基中生長

Answer 1

【答案】C

【解析】

據圖分析，BamHⅠ切割位點在目的基因上，不能用該酶切割外源DNA；該外源DNA右側只有PstⅠ一種限制酶，而該酶會破壞甲圖質粒上的標記基因ampr；該外源DNA左側有兩個限制酶切割位點，其中PstⅠ切割會導致目的基因的自身連接以及與質粒的任意連接，因此左側應該用HindⅢ進行切割。

圖甲中的質粒用BamHⅠ切割后，相當于一個直鏈DNA，含2個游離的磷酸基團，A錯誤；根據以上分析已知，BamHⅠ會破壞目的基因，不能用于外源DNA的切割，B錯誤；用PstⅠ和HindⅢ酶切質粒和目的基因，使得目的基因和質粒的兩端分別形成兩種粘性末端，可以保證重組DNA序列的唯一性，C正確；根據以上分析已知，該過程中使用的PstⅠ已經破壞了Ampr（氨芐青霉素抗性基因），因此導入目的基因的大腸桿菌不能在含氨芐青霉素的培養基中生長，應該在含新霉素的培養基中生長，D錯誤。