Question

【題目】(五）回答有關現代生物技術應用的問題。

乳糖不耐受是由于乳糖酶（LCT)分泌少，不能完全消化分解母乳或牛乳中的乳糖所引起的非感染性腹瀉。我國利用生物技術培育出轉基因低乳糖奶牛新品種，給患乳糖不耐癥患者帶來福音。上圖為轉基因低乳糖奶牛培育流程。下圖是使用限制酶BamHⅠ切開DNA產生的結果。

【1】圖中的牛胎兒成纖維細胞無法直接發育成個體，需要去核卵母細胞的細胞質誘導才能實現 。

A. 細胞全能性 B. 細胞核全能性

C. 細胞質全能性 D. 細胞融合

【2】據圖分析，BamHⅠ的識別序列以及切割位點（用“↓”表示）是________。

【3】圖中質粒S用BamHⅠ和HindⅢ聯合酶切后形成1.8kb和8.2kb(1kb=1000對堿基)兩種片段，若用BamHⅠ和EcoRⅠ聯合酶切重組質粒T，獲得1.6kb和8.8kb兩種片段，則轉入的LCT基因長度為____kb。

【4】分析圖，成功導入質粒T的牛胎兒成纖維細胞與轉基因低乳糖奶牛的乳腺細胞中的化合物，在表中用“√”表示存在，用“×”表示不存在。

化合物	牛胎兒成纖維細胞	轉基因低乳糖奶牛乳腺細胞
LCT基因
LCTmRNA
LCT

【5】培育轉基因奶牛涉及的生物技術有_____________________(寫出兩種）。

Answer 1

【答案】

【1】B

【2】

【3】2.2

【4】

【5】動物細胞培養技術、細胞核移植技術、轉基因技術

【解析】試題分析：本題綜合考查基因工程、細胞工程和的相關知識，要求學生識記核移植的具體過程；胚胎移植的基本程序；識記基因工程的具體操作步驟，掌握各步驟中的細節，能結合所學的知識準確答題。據圖分析，用限制酶分別切割質粒和含目的基因的DNA，然后用DNA連接酶將目的基因與質粒連接在一起構成基因表達載體，把含有目的基因的基因表達載體導入牛胎兒成纖維細胞，再通過核移植技術獲得重組細胞。最后通過早期胚胎培養培育出轉基因低乳糖奶牛新品種。

【1】牛胎兒成纖維細胞是高度分化的動物細胞，其全能性受到限制，但細胞核仍保持著全能性，離體的動物細胞經過核移植形成重組細胞，在適宜條件下才能發育成完整個體。由于去核卵母細胞具備豐富的細胞質（包括各種細胞器），分化程度低，能夠發揮出最大的分裂分化潛能，在其誘導下，重組細胞容易表現出全能性。故選：B。

【2】據圖分析可知，BamHⅠ的識別序列以及切割位點是。

【3】據圖分析可知，質粒S用BamHⅠ和HindⅢ聯合酶切后形成1.8kb和8.2kb(1kb=1000對堿基)兩種片段，如圖所示（以下圖中弧線長度均沿著順時針方向閱讀），AB的長度為1.8kb，BA的長度為8.2kb，若用BamHⅠ和EcoRⅠ聯合酶切重組質粒T，獲得1.6kb和8.8kb兩種片段，如圖所示： ，圖中的CD的長度為1.6kb，DC的長度為8.8kb， LCT基因的長度即CE的長度=CD+DE，結合這兩個圖看，DE的長度=DC的長度-BA的長度=8.8-8.2=0.6kb，因此LCT基因的長度即CE的長度=CD+DE=1.6+0.6=2.2kb。

【4】由于通過基因工程把LCT基因導入牛胎兒成纖維細胞，再通過胚胎工程獲得了轉基因低乳糖奶牛，因此牛胎兒成纖維細胞以及轉基因低乳糖奶牛乳腺細胞都含有LCT基因，但是由于基因的選擇性表達，只是在轉基因低乳糖奶牛的乳腺細胞中含有LCTmRNA與LCT。因此牛胎兒成纖維細胞以及轉基因低乳糖奶牛乳腺細胞含有的化合物情況如圖所示：

【5】據圖分析可知，重組細胞的形成用到了轉基因技術與核移植技術，重組細胞發育成低乳糖奶牛的過程用到了動物細胞培養技術及早期胚胎培養技術。