Question

【題目】下圖為某種哺乳動物體細胞核移植過程圖�；卮鹣铝袉栴}。

（1）①處需要用_______________等處理，然后分瓶繼續培養；細胞培養需要O2和CO2，CO2的主要作用是______________________。

（2）卵母細胞在體外培養到____________________時進行去核。與去核卵母細胞融合的供體細胞培養一般不會超過10代，原因是________________________。激活受體細胞除了用電刺激的方法外，還可以用 ______________________________________。（寫一種實際方法）

（3）動物細胞核移植的難度高于胚胎細胞核移植的原因是_______________________ 。

Answer 1

【答案】 胰蛋白酶 維持培養液的pH 減數第二次分裂中期 保持細胞正常的二倍體核型 鈣離子載體（或乙醇、蛋白酶合成抑制劑等） 動物胚胎的細胞分化程度低，恢復其全能性相對容易，而動物體細胞分化程度高，恢復其全能性十分困難

【解析】試題分析：據題圖科可知，圖示為轉基因克隆奶牛的培育過程，該過程采用了動物細胞培養技術、動物體核移植技術、早期胚胎培養技術、胚胎移植技術。

（1）貼面瓶壁的細胞需要用胰蛋白酶等處理，然后分瓶培養，讓細胞繼續增殖；在培養過程中，將成動物細胞置于5% CO2的氣體環境中，CO2的作用是維持培養基（液）的pH。

（2）由于減數第二次分裂中期的卵母細胞核的位置靠近第一極體，用微型吸管可一并吸出細胞核與第一極體；細胞一般傳至10代后就不易傳下去，一般來說，細胞在傳至10至50代左右，增殖會逐漸緩慢，以至于完全停止，這時部分細胞的細胞核型可能會發生變化，與去核卵母細胞融合的供體細胞培養一般不會超過10代，原因是保持細胞正常的二倍體核型 。用物理或化學方法可以激活受體細胞，使其完成細胞分裂和發育進程，具體的方法有電脈沖、鈣離子載體、乙醇、蛋白酶合成抑制劑等。
（3）動物胚胎的細胞分化程度低，恢復其全能性相對容易，而動物體細胞分化程度高，恢復其全能性十分困難，因此，動物細胞核移植的難度高于胚胎細胞核移植。