Question

3．某同學從新鮮的泡菜濾液為實驗材料純化乳酸菌．請回答下列問題：
（1）分離純化乳酸菌時，首先需要用無菌水對泡菜濾液進行梯度稀釋，進行梯度稀釋的目的是保證在固體培養基上獲得單菌落．
（2）制作的培養基必須使用高壓蒸汽滅菌鍋（填儀器名稱）滅菌后才能使用．如果在配制培養基的過程中加入碳酸鈣，制出的培養基就顯得不透明，用這種培養基來分離純化乳酸菌，碳酸鈣起到的作用有鑒別和乳酸菌中和產生的酸（或乳酸，維持PH相對穩定）．肉眼能明顯觀察到菌落時應挑選出具有透明圈的菌落作為候選菌．
（3）獲得的乳酸菌菌種若要采取臨時保藏，首先要將菌種接種到試管的固體斜面培養基上，并在適宜的溫度下培養，當菌落長成后才放入4⁰C的冰箱保存．

Answer 1

分析 （1）泡菜的制作原理
泡菜的制作離不開乳酸菌．在無氧條件下，乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸．
（2）測定亞硝酸鹽含量的原理
在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發生重氮化反應后，與N1萘基乙二胺鹽酸鹽結合形成玫瑰紅色染料．將顯色反應后的樣品與已知濃度的標準液進行目測對比，可以大致估算出亞硝酸鹽的含量．
（3）泡菜的制作

解答 解：（1）分離純化乳酸菌時，首先需要用無菌水對泡菜濾液進行梯度稀釋；進行梯度稀釋的理由是在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的乳酸菌將被分散成單個細胞，從而能在固體培養基表面形成單個的菌落．
（2）制作的培養基必須使用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌后才能使用．在分離純化所用的培養基中加入碳酸鈣的作用是中和乳酸菌代謝過程中產生的乳酸和利于乳酸菌的識別和分離；分離純化時應挑選出在平板上有透明圈的菌落作為候選菌．
（3）獲得的乳酸菌菌種若要采取臨時保藏，首先要將菌種接種到試管的固體斜面培養基上，并在適宜的溫度下培養，當菌落長成后才放入 4⁰C的冰箱保存．
故答案為：
（1）無菌水  固體   單菌落
（2）高壓蒸汽滅菌鍋   鑒別    乳酸菌中和產生的酸（或乳酸，維持PH相對穩定）具有透明圈
（3）固體斜面培養基    4⁰C

點評 本題主要以泡菜的制作為前提，考生微生物應用的相關知識，意在考查考生把握知識間內在聯系的能力．