Question

【題目】埃博拉病毒是一種強(qiáng)致病性RNA病毒，以埃博拉病毒外殼某蛋白為主要抗原制備疫苗和抗體是預(yù)防和診療埃博拉出血熱的一種有效策略。其疫苗生產(chǎn)和抗體制備的流程之一如圖：

（1）過(guò)程①需要在______________酶的催化下合成DNA，將獲得的DNA與載體連接后導(dǎo)入受體菌群建立病毒的_________文庫(kù)，再?gòu)闹泻Y選出A基因。

（2）過(guò)程②利用PCR技術(shù)擴(kuò)增A某因時(shí)，需在_________酶的作用下進(jìn)行，PCR技術(shù)的原理是_________。

（3）過(guò)程③采用的技術(shù)手段是_________，獲得的X是_________。

（4）可選用圖中基因工程生產(chǎn)的_________所制備的疫苗注射到健康人體內(nèi)，對(duì)埃博拉病毒進(jìn)行免疫預(yù)防，對(duì)該傳染病疑似患者確診時(shí)，可從疑似患者體內(nèi)分離病毒，與圖中的_________進(jìn)行特異性結(jié)合檢測(cè)。

Answer 1

【答案】 逆轉(zhuǎn)錄 基因組 熱穩(wěn)定DNA聚合（Taq） DNA雙鏈復(fù)制 動(dòng)物細(xì)胞融合 雜交瘤細(xì)胞 A蛋白 抗A蛋白的單克隆抗體

【解析】試題分析：本題難度不大，綜合性較強(qiáng)，考查了基因工程、單克隆抗體的制備、PCR技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等相關(guān)知識(shí)，要求學(xué)生生具有扎實(shí)的基礎(chǔ)知識(shí)，并構(gòu)建一定的知識(shí)網(wǎng)絡(luò)。圖示過(guò)程中，①表示逆轉(zhuǎn)錄形成DNA的過(guò)程；②表示獲取A（目的）基因的過(guò)程；③表示細(xì)胞融合的過(guò)程，X為雜交瘤細(xì)胞。PCR技術(shù)的過(guò)程：高溫變性、低溫復(fù)性、中溫延伸。條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。

（1）埃博拉病毒的遺傳物質(zhì)是RNA，過(guò)程①代表的是逆轉(zhuǎn)錄的過(guò)程，需要在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化下合成DNA。基因文庫(kù)是指將含有某種生物不同基因的許多DNA片段，導(dǎo)入到受體菌的群體中儲(chǔ)存，各個(gè)受體菌分別含有這種生物的不同基因。基因組文庫(kù)包含某種生物所有的基因；部分基因文庫(kù)包含某種生物的部分基因。將獲得的DNA與載體連接后導(dǎo)入受體菌群建立病毒的基因組文庫(kù)，再?gòu)闹泻Y選出A基因。

（2）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增A基因時(shí)，根據(jù)A基因兩端的部分核苷酸序列設(shè)計(jì)引物序列，加入引物的作用是與A基因單鏈相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合，然后在熱穩(wěn)定DNA聚合（Taq）作用下進(jìn)行延伸。PCR技術(shù)所依據(jù)的原理是DNA雙鏈復(fù)制。

（3）③過(guò)程需要采用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)，根據(jù)圖中信息可知X為雜交瘤細(xì)胞。

（4）圖中的A蛋白相當(dāng)于抗原，因此可選用圖中基因工程生產(chǎn)的A蛋白所制備的疫苗對(duì)健康人進(jìn)行該傳染病進(jìn)行免疫預(yù)防。對(duì)該傳染病疑似患者確診時(shí)，可以從疑似患者體內(nèi)分離出病毒，與圖中的抗A蛋白的單克隆抗體進(jìn)行特異性結(jié)合檢測(cè)。