Question

【題目】科研人員從耐鹽植物中獲得了耐鹽基因，利用轉基因技術將耐鹽基因轉入水稻細胞中，進而培育出了耐鹽水稻新品系。下圖表示構建耐鹽基因表達載體的過程。請回答下列問題：

(1)據圖分析可知，在構建的耐鹽基因表達載體中，圖中未標注出的必需元件有耐鹽基因啟動子，其功能是_________________________________。

(2)據圖分析可知，在構建耐鹽基因表達載體時，需要用______________對質粒進行切割，從而保證______________________________。

(3)常用農桿菌轉化法將耐鹽基因導入水稻受體細胞，根據農桿菌的感染特點，將耐鹽基因插入Ti質粒的T-DNA上，經過轉化作用進入水稻細胞，并將其插入水稻細胞______________上，從而使其遺傳特性得以穩定維持和表達。

(4)受體細胞經誘導后形成愈傷組織的過程稱為______________，進一步培育成幼苗，這體現了___________________________。檢測轉基因水稻是否培育成功可使用的最簡便的方法是________________________________。

Answer 1

【答案】作為RNA聚合酶識別和結合的部位，能驅動目的基因轉錄 HindIII、XbaI 耐鹽基因與質粒正確連接 染色體的DNA 脫分化 植物細胞的全能性 將其種植在鹽堿地上

【解析】

據圖分析，圖示為構建基因表達載體的過程，目的基因是耐鹽基因，插入質粒的位點1與位點2之間；目的基因兩側含有兩種不同的限制酶HindⅢ和XbaⅠ；質粒上的氨芐青霉素抗性基因為標記基因。

（1）基因表達載體的基本組成成分包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等，其中啟動子是RNA聚合酶識別和的結合位點，啟動基因的轉錄。

（2）根據以上分析已知，目的基因兩側含有兩種不同的限制酶HindⅢ和XbaⅠ，因此應該用這兩種酶對目的基因和質粒進行切割，從而保證耐鹽基因與質粒正確連接。

（3）在利用農桿菌轉化法將目的基因導入水稻細胞（植物細胞）時，應該將耐鹽基因插入Ti質粒的T-DNA上，經過轉化作用進入水稻細胞，并將其插入水稻細胞染色體的DNA上。

（4）受體細胞通過脫分化形成愈傷組織，最終培育成幼苗，該過程為植物組織培養過程，原理是植物細胞的全能性；檢測轉基因水稻是否培育成功，最簡單的方法是將其種植在鹽堿地上，觀察其生長情況。