Question

【題目】幽門螺桿菌（Hp）感染是急慢性胃炎和消化道潰瘍的主要致病因素，其不良預后是胃癌．據研究發現，目前我國有超過50%人感染了Hp病菌．Hp是微需氧菌，環境氧要求5%～8%，在大氣或絕對厭氧環境下均能生長，Hp的尿素酶極為豐富，尿素酶催化尿素水解形成“氨云”保護細菌在高酸環境下生存． 在患者體內采集樣本并制成菌液后，進行分離培養．實驗基本步驟如下：
配制培養基→滅菌、倒平板→X→培養→觀察．請回答：
（1）在配制培養基時，要加入尿素和酚紅指示劑，這是因為Hp含有 ， 它能以尿素作為氮源；若有Hp，則菌落周圍會出現色環帶．
（2）步驟X的操作如圖所示：
①微生物接種的方法很多，但都要注意；圖所示方法為 ．
②圖示每次取樣前需用手指輕壓移液管上的橡皮頭，吹吸三次，目的是 ．
③下列關于此實驗的操作，正確的是 ．
A．高壓蒸汽滅菌加熱結束時，打開放氣閥使壓力表指針回到零后，開啟鍋蓋
B．含酚紅指示劑的尿素為唯一氮源的培養基滅菌后，冷卻至室溫倒平板
C．取103、104、105倍的稀釋液和無菌水各0.1mL，分別涂布于各組平板上
D．在皿蓋上用記號筆做標記
（3）在培養時，需將培養皿并放在恒溫培養箱中，否則將可能導致 ．
（4）臨床上14C呼氣試驗檢測是一種安全、準確的檢測Hp的方法，其基本原理是當被檢測者服用含有的膠囊后，如患者的胃內存在Hp感染，則可將其分解為氨和14CO2 ．

Answer 1

【答案】
（1）尿素酶；紅
（2）防止雜菌的污染；稀釋涂布平板法；使微生物和無菌水混合均勻；C
（3）倒置；無法形成單一菌落
（4）14C標記尿素
【解析】解：（1）由于尿素分解細菌能合成脲酶，脲酶能將尿素分解成氨，而氨會使培養基堿性增強，即pH升高，導致酚紅指示劑變紅．（2）①微生物接種的方法很多，但都要注意防止雜菌的污染；接種微生物常用平板劃線法和稀釋涂布平板法，圖示所示為稀釋涂布平板法．②圖示每次取樣前需用手指輕壓移液管上的橡皮頭，吹吸三次，目的是使微生物和無菌水混合均勻．③A．高壓滅菌加熱結束，等待壓力表指針回到零后，才能開啟鍋蓋，不能打開放氣閥使壓力表指針回到零，A錯誤； B．含酚紅指示劑的尿素為唯一氮源的培養基滅菌后，冷卻至50℃左右倒平板，不需要冷卻到室溫，B錯誤；
C．取103、104、105倍的稀釋液和無菌水各0.1mL，分別涂布于各組平板上，C正確；
D．用記號筆標記培養皿中菌落時，應標記在皿底上，D錯誤．
故選：C．（3）培養時需將培養皿倒置并放在恒溫箱中培養，倒置培養的目的也是為了獲得單一菌落．（4）如果人體感染了Hp，能將尿素分解為NH3和CO2 ， 因而標記尿素中的C，可通過呼吸產物來判斷是否感染Hp．
所以答案是：（1）尿素酶　 紅（2）①防止雜菌的污染 稀釋涂布平板法 ②使微生物和無菌水混合均勻 ③C（3）倒置　 無法形成單一菌落（4）14C標記尿素