Question

【題目】如圖是利用基因工程技術生產人胰島素的操作過程示意圖，請據圖作答．

（1）基因工程的基本操作程序主要包括四個步驟是：_____、_____、_____、　____．

（2）過程②必需的酶是______酶，過程③必需的酶是______酶．

（3）與人體細胞中胰島素基因相比，通過②過程獲得的目的基因不含有非編碼區和______．

（4）在利用AB獲得C的過程中，必須用______切割A和B，使它們產生______，再加入______，才可形成C．

（5）為使過程⑧更易進行，可用______（藥劑）處理D．一般將目的基因導入植物細胞采用最多的方法是______．

Answer 1

【答案】獲取目的基因 構建表達載體導入受體細胞目的基因檢測與鑒定逆轉錄解旋內含子同種限制性內切酶相同的黏性末端DNA連接酶CaCl2農桿菌轉化法

【解析】

根據題意和圖示分析可知：圖示是利用基因工程技術生產胰島素的操作過程示意圖。圖中①表示從胰島B細胞中獲取胰島素mRNA的過程；②為逆轉錄過程，A為胰島素基因；③④⑤表示目的基因的擴增過程；⑥表示用限制酶切割運載體形成黏性末端的過程；⑦表示基因表達載體的構建過程；⑧表示將目的基因導入受體細胞的過程；⑨表示目的基因隨著受體細胞的增殖和擴增；⑩是從培養液中獲取胰島素的過程。

（1）基因工程的操作步驟：目的基因的獲取→基因表達載體的構建→將目的基因導入受體細胞→目的基因的檢測和鑒定。

（2）②為逆轉錄過程，需要逆轉錄酶的參與；過程③是將DNA分子雙鏈拆分成兩條單鏈，所以必需的酶是解旋酶。

（3）與人體細胞中胰島素基因相比，通過②過程獲得的目的基因不含有非編碼區和內含子。

（4）在利用AB獲得C的過程中，必須用同種限制性內切酶切割A和B，使它們產生相同的黏性末端，再加入DNA連接酶，才可形成C。

（5）⑧是將目的基因導入受體細胞的過程，當受體細胞是微生物細胞時，常采用感受態細胞法，即用CaCl2處理微生物細胞使其成為易于吸收周圍環境中DNA分子的感受態細胞，從而將目的基因導入受體細胞．一般將目的基因導入植物細胞采用最多的方法是農桿菌轉化法。