Question

【題目】回答（一）、（二）小題

（一） 苯酚及其衍生物廣泛存在于工業廢水中，對環境有嚴重危害。小明同學準備依據下圖操作步驟，從處理廢水的活性污泥中分離篩選酚降解高效菌株。請回答下列問題:

（1）酚降解菌富集培養基含有蛋白胨、K2HPO4 、MgSO4、苯酚和水，其中可作為碳源的有____________。

（2）將采集到的樣品接種培養，苯酚用量應隨轉接次數增加而逐漸___________。以達到富集酚降解菌的目的。若上圖平板中菌落過于密集，應進一步_________，以便于菌落計數與分離。制備平板培養基時除了需要水、營養物質外，還必須添加______________。

（3）下圖為連續劃線法示意圖，在圖中_____________（填圖中序號）區域更易獲得單菌落。

（4）采用比色測定法（使用苯酚顯色劑）檢測降解后的廢水中苯酚殘留量。先制作系列濃度梯度并進行顯色反應，下表中 1 ~5 號比色管的苯酚濃度應分別為____________。

如果廢水為 50 mg/ L 苯酚溶液， 降解后約有 21%的苯酚殘留， 則需將殘留液稀釋____________________________ （填序號：①5②10③20）倍后，再進行比色。

（二）回答與動物克隆有關的問題

2017 年 11 月，世界上首個體細胞克隆猴“中中”在中國誕生。這一研究成果入選“2018 年度中國科學十大進展”。

（1）克隆猴的出生屬于____________生殖。在培養過程中，需要將體細胞核與去核卵細胞融合， 形成____________，待發育到____________，轉移到_______________的母猴中。

（2）克隆猴的成功誕生，證明了在胚胎和個體發育中，___________具有調控細胞核發育的作用。但從 1997 年第一只克隆羊“多莉”誕生，到第一只克隆猴“中中”的誕生，歷經20 年。動物克隆始終存在很大的困難，這是由于______________。

（3）克隆猴的誕生，在腦認知功能研究、重大疾病早期診斷與干預、藥物研發等方面，能夠起到 重要 作用。 在藥 物研發 方面 ， 與 傳統藥 檢對 象相比 ， 克 隆猴 的優勢是__________________________。

Answer 1

【答案】蛋白胨、苯酚 增加 稀釋涂布 凝固劑 ③ 0、0．2、0．4、0．6、0．8 ③ 無性 重組細胞 早期胚胎 同期發情 細胞質 動物細胞在形態和功能上高度特化/基因表達調控使得細胞合成了專一的蛋白質 基因、生理結構與人類更為接近，可以更好地觀察藥效

【解析】

1、微生物培養基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養物質以及氧氣的要求．對異養微生物來說，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作為營養要素成分時并不是起單一方面的作用。

2、微生物常見的接種的方法

①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落。

（一）

（1）培養基成分中的有機物均可以提供碳源，即蛋白胨、苯酚均可以作為碳源。

（2）分析實驗可知，實驗目的是篩選苯酚降解菌，因此將采集到的樣品接種培養，苯酚用量應隨轉接次數增加而逐漸增加，以達到富集酚降解菌的目的。若圖1平板中菌落過于密集，應進一步稀釋涂布，以便于菌落計數與分離。平板培養基屬于固體培養基，該培養基需要加入瓊脂作為凝固劑。

（3）圖2為平板劃線法，隨著劃線次數的增加，菌種進一步被稀釋，因此圖中③區域更易獲得單菌落。

（4）進行實驗時，首先需要設置濃度為0的苯酚作為空白對照組，并且6號試管苯酚濃度為1，由此可見，濃度梯度應該為0.2，即表中1～5號比色管的苯酚濃度應分別為0、0.2、0.4、0.6、0.8。如果廢水為50mg/L 苯酚溶液，降解后約有21%的苯酚殘留，即殘留液中苯酚濃度約為10mg/L，與以上6支試管中的濃度相比，需要將殘留液稀釋20倍后，再進行比色。

（二）

（1）克隆猴的出生沒有經過兩性生殖細胞的結合，所以屬于無性生殖。在培養過程中，需要將體細胞核與去核卵細胞融合，形成重組細胞，待發育到早期胚胎，轉移到同期發情的母猴中，直至完成胚胎發育而產出。

（2）克隆猴的成功誕生，證明了在胚胎和個體發育中，去核的卵母細胞的細胞質具有調控細胞核發育的作用。動物克隆始終存在很大的困難，這是由于動物細胞在形態和功能上高度特化或基因表達調控使得細胞合成了專一的蛋白質。

（3）在藥物研發方面，與傳統藥檢對象相比，克隆猴的優勢是基因、生理結構與人類更為接近，可以更好地觀察藥效。