Question

【題目】為證明青霉素在某種細菌產(chǎn)生抗藥性過程中所起的作用是選擇而非誘變,有如下實驗方案。其中,平板影印指用無菌絨布輕蓋在已長好菌落的原培養(yǎng)基上,然后不轉(zhuǎn)動任何角度,“復(fù)印”至新的培養(yǎng)基上進行接種。請回答:

（1）圖中擴大培養(yǎng)的過程中應(yīng)選用__________培養(yǎng)基。利用__________分離法可獲得培養(yǎng)皿上菌落。

（2）圖中②過程培養(yǎng)基的配方如下:

成分	無機鹽	蔗糖	葡萄糖	尿素	牛肉膏	水	瓊脂	酚紅
培養(yǎng)基	+	-	+	+	-	+	+	-

結(jié)合圖形分析__________(“能”或“不能”)得出結(jié)論:該細菌可利用尿素作為氮源。理由是:__________。

（3） B組培養(yǎng)基中還添加了適宜濃度的青霉素,結(jié)果如圖所示。欲證明青霉素所起的作用是選擇,則應(yīng)選取__________(A. a1 B. a2 C. b1或b2或3 D.任意一個菌落)菌落繼續(xù)培養(yǎng)在空白的A2培養(yǎng)皿中,待長出菌落后影印到含相同濃度青霉素的C培養(yǎng)皿中。

（4）預(yù)測上述A2和C培養(yǎng)皿中菌落的生長情況為__________(“相同”或“不同”),由此證明青霉素所起的作用是選擇。

（5）下列關(guān)于微生物培養(yǎng)的敘述,正確的是（_____）

A.實驗過程中所有器皿和培養(yǎng)基都必須用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌

B.實驗操作過程中必須打開超凈臺上的紫外燈和過濾風(fēng)

C.涂布分離法,單菌落更易分開,但操作更復(fù)雜

D.采用劃線分離時,在每次劃線前都需蘸取菌液一次

Answer 1

【答案】 液體 涂布 不能 該細菌可能利用氮氣作為氮源或培養(yǎng)基中無酚紅,無法證明該細菌分解了尿素 A 相同 C

【解析】本題考查微生物的培養(yǎng)和分離的知識點，意在強化學(xué)生的識記和理解能力。

(1)液體培養(yǎng)基具有進行通氣培養(yǎng)、振蕩培養(yǎng)的優(yōu)點，在通氣或在振蕩的條件下，有利于營養(yǎng)物質(zhì)的攝入以及增加供氧量，所以有利于細胞生長，提高生微生物數(shù)量。故圖中擴大培養(yǎng)的過程中應(yīng)選用液體培養(yǎng)基；菌種的分離常用涂布平板法。

（2）由表格內(nèi)容可知，葡萄糖是碳源，尿素是氮源，但微生物也可能利用空氣中的氮氣作為氮源，故不能得出該細菌可利用尿素作為氮源的結(jié)論；并且培養(yǎng)基中未加入酚紅指示劑，不能對菌種作進一步的鑒定；

（3）欲證明青霉素所起的作用是選擇，菌種應(yīng)在未添加青霉素的培養(yǎng)基中選擇，即選擇a1菌落繼續(xù)培養(yǎng)在空白的A2培養(yǎng)皿中擴大培養(yǎng)，待長出菌落后影印到含相同濃度青霉素的C培養(yǎng)皿中。

（4）如果A2和C培養(yǎng)皿中菌落的生長情況相同，則證明變異是在接觸青霉素之前就已經(jīng)產(chǎn)生了，青霉素所起的作用是選擇。

（5）培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌，接種環(huán)等用具可用灼燒滅菌，A項錯誤；紫外線對人有傷害，如果超凈臺的玻璃關(guān)死，也沒必要開吹風(fēng)，B項錯誤；常用接種方法中的稀釋涂布平板法一般多用于篩選菌株，可以計數(shù)，可以觀察菌落特征，但由于需要多次稀釋，操作較復(fù)雜，C項正確；采用劃線分離時，在每次劃線前都要對接種環(huán)灼燒處理，目的是清除殘留的菌種，如果再蘸取菌液，將達不到稀釋的目的，D項錯誤；

[點睛]：微生物培養(yǎng)中的易混點：1.無菌技術(shù)中對相關(guān)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等用不同的滅菌方法；2. 常用接種方法：平板劃線法一般多用于菌種的純化，可以觀察菌落特征；稀釋涂布平板法一般多用于篩選菌株，可以計數(shù)，可以觀察菌落特征；3.在以尿素為惟一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，培養(yǎng)某種細菌后，如果pH升高，指示劑將變紅，這樣就能初步鑒定該種細菌能夠分解尿素。