Question

【題目】我國曾經發生過因“非典型性肺炎”而死亡的病例，經研究發現，該病是由SARS病毒（一種RNA病毒）感染所引起的疾病．SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康復后的血清中有抗S蛋白的特異性抗體．某研究小組為了研制預防SARS病毒的疫苗，開展了前期研究工作，其簡要的操作流程如圖：
（1）實驗步驟①所代表的反應過程是 ．
（2）步驟②構建重組表達載體A和重組表達載體B必須使用限制酶和酶，后者的作用是將用限制性核酸內切酶切割的S蛋白基因和連接起來．
（3）如果省略步驟②而將大量擴增的S蛋白基因直接導入大腸桿菌，一般情況下，不能得到表達的S蛋白，其原因是S蛋白基因在大腸桿菌中不能 ， 也不能 ．
（4）為了檢驗步驟④所表達的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同的免疫反應特性，可用與SARS康復病人血清進行抗原﹣抗體特異性反應實驗，從而得出結論．
（5）步驟④和⑥的結果相比，原核細胞表達的S蛋白與真核細胞表達的S蛋白的氨基酸序列（填“相同”或“不同”），根本原因是 ．

Answer 1

【答案】
（1）反轉錄
（2）DNA連接；載體
（3）復制；合成S蛋白基因的mRNA
（4）大腸桿菌中表達的S蛋白
（5）相同；表達蛋白質所用的基因相同
【解析】解：（1）實驗步驟①RNA控制DNA合成，該過程是反（逆）轉錄．（2）步驟②構建重組表達載體A和重組表達載體B，必須使用同種限制性核酸內切酶切割目的基因和載體，形成相同的粘性末端，再用DNA連接酶，形成重組DNA．（3）如果省略步驟③基因表達載體的構建，而將大量擴增的S基因直接導入大腸桿菌，一般情況下，不能得到表達的S蛋白，其原因是S基因在大腸桿菌中不能進行復制，也不能進行以其為模板合成S基因的mRNA（或轉錄）．（4）步驟④檢測所表達的S蛋白的特征，可用大腸桿菌中表達的S蛋白與SARS康復病人血清進行抗原﹣抗體特異性反應實驗，如果能夠特異性的結合，說明表達成功．（5）步驟④和⑥的結果相比，原核細胞表達的S蛋白與真核細胞表達的S蛋白的氨基酸序列相同，根本原因是表達蛋白質所用的目的基因相同． 所以答案是：（1）反轉錄；（2）DNA連接；載體；（3）復制；合成S蛋白基因的mRNA；（4）大腸桿菌中表達的S蛋白；（5）相同；表達蛋白質所用的基因相同
【考點精析】本題主要考查了基因工程的原理及技術的相關知識點，需要掌握基因工程的原理是利用DNA重組技術才能正確解答此題．