Question

【題目】運用所學知識回答下列問題：
將蘇云金桿菌Bt蛋白的基因導入棉花細胞中，可獲得抗棉鈴蟲的轉基因棉，其過程如如圖所示（注：農桿菌中Ti質粒上只有T﹣DNA片段能轉移到植物細胞中）．

（1）過程①需用同種酶對含Bt基因的DNA和Ti質粒進行酶切．為將過程②獲得的含重組質粒的農桿菌篩選出來，應使用培養基．
（2）過程③中將棉花細胞與農桿菌混合后共同培養，旨在讓進入棉花細胞；除盡農桿菌后，還須轉接到含卡那霉素的培養基上繼續培養，目的是 ．
（3）檢驗轉基因棉的抗蟲性狀，常用方法是 ． 種植轉基因抗蟲棉能減少的使用，以減輕環境污染．
（4）已知IgG抗體能消除狂犬病病毒．特異性IgG抗體獲取也可用單克隆抗體制備法，下面是單克隆抗體的制備過程示意圖，請回答下列問題．

①從小鼠的脾臟中取得B淋巴細胞之前，給小鼠注射的物質A是 ．
②動物細胞融合除了采用植物原生質體融合常用的誘導方法外，還可以采用 ．
③B過程的目的是 ．
④單克隆抗體與常規的血清抗體相比，最大的優越性是 ．

Answer 1

【答案】
（1）限制性核酸內切酶,選擇
（2）T﹣DNA,篩選獲得T﹣DNA片段的植物細胞
（3）投放棉鈴蟲,農藥
（4）狂犬病病毒（抗原）,滅活的病毒,篩選出能夠產生特異性抗體的雜交瘤細胞,特異性強,靈敏度高,可大量制備
【解析】解：（1）過程①表示基因表達載體的構建，為了獲得相同的黏性末端，需用同種限制性核酸內切酶對含Bt基因的DNA和Ti質粒進行酶切．為將過程②獲得的含重組質粒的農桿菌篩選出來，應使用選擇培養基．（2）過程③中將棉花細胞與農桿菌混合后共同培養，旨在讓T﹣DNA進入棉花細胞；除盡農桿菌后，還須轉接到含卡那霉素的培養基上繼續培養，篩選獲得T﹣DNA片段的植物細胞．（3）檢驗轉基因棉的抗蟲性狀，常用個體水平進行鑒定，即投放棉鈴蟲．種植轉基因抗蟲棉能減少農藥的使用，以減輕環境污染．（4）①制備單克隆抗體需要獲得已免疫的B淋巴細胞，因此需要給小鼠注射狂犬病病毒（抗原）．②植物原生質體融合的方法包括物理法和化學法，動物細胞融合除了這兩種誘導方法外，還可以采用滅活的病毒．③B過程的目的是篩選出能夠產生特異性抗體的雜交瘤細胞．④單克隆抗體與常規的血清抗體相比，最大的優越性是特異性強，靈敏度高，可大量制備．

所以答案是：（1）限制性核酸內切酶 選擇 （2）T﹣DNA 篩選獲得T﹣DNA片段的植物細胞（3）投放棉鈴蟲 農藥（4）①狂犬病病毒（抗原） ②滅活的病毒 ③篩選出能夠產生特異性抗體的雜交瘤細胞④特異性強，靈敏度高，可大量制備

【考點精析】認真審題，首先需要了解基因工程的原理及技術(基因工程的原理是利用DNA重組技術)，還要掌握單克隆抗體的制備(對免疫小鼠注射特定的抗原蛋白；提取B淋巴細胞；同時用動物細胞培養的方法培養骨髓瘤細胞并提�。淮偈顾鼈兗毎�融合；在特定的選擇培養基上篩選出融合的雜種細胞；然后對它進行克隆化培養和抗體檢測；最后將雜交瘤細胞在體外做大規模培養或注射入小鼠腹腔內增殖，從細胞培養液或小鼠腹水中可得到大量的單克隆抗體)的相關知識才是答題的關鍵．