Question

【題目】近年基因編輯技術在基因治療的應用領域展現(xiàn)出極大的應用前景。

（1）大部分基因治療的臨床試驗，都是先從病人體內獲得某種細胞，例如淋巴細胞，進行培養(yǎng)，然后在體外完成基因轉移，再篩選成功轉移的細胞擴增培養(yǎng)，最后重新輸入患者體內。上述方法稱為________基因治療。

（2）用 技術治療遺傳病的基本過程是：根據遺傳病致病基因的序列設計一段（即），將該與蛋白結合形成復合體，并導入患者細胞中，導入方法與外源基因導入人體細胞相似，可采用________法；進入細胞后的復合體在的指引下按照________原則準確地結合在致病基因部位，而蛋白則對致病基因進行切割。由此可見蛋白應該是一種________酶。

（3）治療中不能對患病個體的每個細胞都注射該復合體。研究人員選用動物病毒為運載體，從而使復合體在運載體的協(xié)助下能夠大量主動進入人體細胞，但在使用前需要對運載體進行________處理，以保證其安全性。該運載體進入人體細胞的方式通常是________。

Answer 1

【答案】體外 顯微注射 堿基互補配對 限制性核酸內切 滅毒（或減毒） 胞吞

【解析】

1、基因工程的工具：①限制酶，能識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂；②DNA連接酶，連接兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵；③運載體，質粒是最常用的運載體，除此之外，還有λ噬菌體衍生物、動植物病毒。

2、基因治療：把正常的基因導入病人體內有缺陷的細胞中，使該基因的表達產物發(fā)揮功能，從而達到治療疾病的目的。基因治療分為體外基因治療和體內基因治療兩種類型。

（1）基因治療分為體外基因治療和體內基因治療兩種類型。體外基因治療：先從病人體內獲得某種細胞進行培養(yǎng)，然后在體外完成基因轉移，再篩選成功轉移的細胞擴增培養(yǎng)，最后重新輸入患者體內。體內基因治療：用基因工程的方法直接向人體組織細胞轉移基因的方法。題干中基因治療的方法屬于體外基因治療。

（2）將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；進入細胞后的復合體在RNA的指引下，按照堿基互補配對原則準確的結合在致病基因部位；Cas蛋白可對致病基因進行切割，基因的本質是有遺傳效應的DNA片段，由此可見，Cas應該是一種限制性核酸內切酶。

（3）利用動物病毒侵染動物細胞的特性，可選用動物病毒為運載體，從而使復合體在運載體的協(xié)助下能夠大量主動進入人體細胞，但為了防止病毒的致病性，在使用前需要對運載體基因滅毒（或減毒） 處理，以保證其安全性。該運載體是大分子物質，進入人體細胞的方式通常是胞吞。