Question

【題目】現代生物技術常用于篩選特定微生物或突變體等用于工業生產。該過程中培養基的配置、培養條件控制、目的菌篩選等都甚為關鍵。請回答相關問題。

（1）某小組用兩種培養基篩選土壤中能高效降解淀粉的細菌（目標菌）。 Ⅰ號培養基：在 LB 培養基中加入淀粉（5g/L）。

Ⅱ號培養基：氯化鈉（5g/L），硝酸銨（3g/L），其他無機鹽（適量），淀粉（15g/L）。

①在Ⅰ號培養基中，為微生物提供氮源的是___________________________。

②若將土壤懸浮液接種在Ⅱ號培養基中，培養一段時間后，不能降解淀粉的細菌比例會下降，其原因是___________________________。

③Ⅱ號培養基中加入適量凝固劑后，可用于分離目標菌并對菌落進行計數，接種時，應采用的方法是___________________________。

（2）下表是兩種細菌在以淀粉為唯一碳源的培養基上培養后測出的相應指標，據表可知細菌___________________________分解淀粉能力較強，原因是___________________________。

（3）進行某些菌種保存時， 需要制備空白斜面， 其中一個關鍵步驟就是在滅菌___________________________（填“前”或“后”）把 LB___________________________(填“固體”或“液體”）培養基分裝到多個試管。

（4）進行植物組織培養時，往往采用由大量元素、微量元素和有機成分組成的 MS 培養基。發芽培養基往往需在 MS 培養基的基礎上添加萘乙酸、芐基腺嘌呤、蔗糖和___________________________后制備而成。

Answer 1

【答案】蛋白胨（或蛋白胨和酵母提取物） 不能降解淀粉的細菌因缺乏碳源不能增殖，而能降解淀粉的細菌能夠增殖 稀釋涂布平板法（涂布分離法） II細菌 II的透明圈直徑/菌落直徑大于細菌Ⅰ 前 固體 瓊脂

【解析】

實驗室中目的菌株的篩選的原理：人為提供有利于目的菌株生長的條件（包括營養、溫度。pH等），同時抑制或阻止其他微生物生長；

篩選淀粉分解菌需要用以淀粉為唯一碳源的選擇培養基，碘液可以鑒別淀粉分解菌，淀粉分解菌菌落周圍會出現透明圈；

培養基按其物理狀態可分為固體培養基、液體培養基和半固體培養基三類；

培養基按其特殊用途可分為加富培養基、選擇性培養基和鑒別培養基；

常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法；

培養基的成分主要是水、無機鹽、碳源、氮源。

（1）①Ⅰ號培養基是在LB 培養基中加入了淀粉，LB培養基的成分有牛肉膏、蛋白胨和NaCl，所以提供氮源的物質是蛋白胨；

②Ⅱ號培養基是以淀粉為唯一碳源的選擇培養基，故只有能利用碳源的微生物才能存活，不能降解淀粉的細菌因缺乏碳源不能增殖，而能降解淀粉的細菌能夠增殖；

③用于分離目標菌并對菌落進行計數的方法是稀釋涂平板法。

（2）根據表可知細菌Ⅱ分解淀粉能力較強，原因是細菌II的透明圈直徑與菌落直徑之比大于細菌Ⅰ。

（3）進行某些菌種保存時， 需要制備空白斜面， 其中關鍵步驟就是在滅菌前把 LB固體培養基分裝到多個試管。

（4）植物組織培養要用固體培養基，所以要在MS培養基的基礎上加上瓊脂。