Question

【題目】在生產研究上，常常需要進行微生物的培養和計數。回答下列與微生物的培養與利用有關的問題：

（1）下圖是利用______________法將微生物接種到固體培養基上，把混合的菌種逐步稀釋分散獲得______________菌落。接種后培養基應______________放在37 ℃恒溫培養箱中進行培養。

（2）分析下面培養基的配方：NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO47H2O、KCl、H2O。若此培養基用于篩選尿素分解菌，則應除去上述培養基成分中的________，并加入______________和________，以補充其生活所需的______________和________。培養基中加入酚紅作指示劑的原因是尿素分解菌能合成________將尿素分解為氨，使培養基pH發生改變，酚紅由黃變紅，使菌落周圍呈現紅色。

（3）三位同學用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中細菌數量。在對應稀釋倍數為106的培養基中，取0.2 mL稀釋液涂布，得到以下統計結果：

甲同學涂布了1個平板，統計的菌落數是260；

乙同學涂布了三個平板，統計的菌落數是210、240和246，取平均值232；

丙同學涂布了三個平板，統計的菌落數是21、212和256，取平均值163；

在三位同學的統計中，____________同學的統計結果是相對準確可信的。按照該同學的結果，每毫升原液中的菌體數是______________。

（4）實驗結束后，使用過的培養基應該進行_____________處理后，才能倒掉。

Answer 1

【答案】 平板劃線 單個 倒置 NaNO3 尿素 葡萄糖 氮源 碳源（要求：前后對應） 脲酶 乙 1.16×109 滅菌

【解析】（1）由圖可知，其采取的是平板劃線法，該方法能把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養基的表面。接種后培養基應倒置放在37 ℃恒溫培養箱中進行培養。

（2）培養分解尿素的細菌，其氮源是尿素，所以培養基中要除去含氮物質，即去除NaNO3，并加入尿素和葡萄糖，以提供氮源和碳源。尿素分解菌能合成脲酶將尿素分解為氨，使培養基pH發生改變，酚紅由黃變紅，使菌落周圍呈現紅色，所以培養基中要加入酚紅作指示劑。

（3）甲同學只涂布了1個平板，實驗數據說服力不夠；丙同學其中一個平板的計數結果與另兩個相差太遠，且少于30個菌落，數據缺乏正確性；乙同學的統計結果是相對準確可信的。乙同學測得平板上菌落數的平均值為232，那么每毫升樣品（涂布平板時所用稀釋液的體積為0.2 mL） 中的菌落數是=232×1/0.2×106=1.16×109（個）。

（4）實驗結束后，使用過的培養基應該進行滅菌處理后，才能倒掉。