Question

【題目】為了分離和純化高效分解石油的細菌，科研人員利用被石油污染過的土壤進行如圖A所示的實驗。

（1）配制好的培養基滅菌通�？梢允褂�___________法。步驟③與步驟②中培養基成分的最大區別是______________________________。

（2）同學甲進行過程④的操作，其中一個平板經培養后的菌落分布如圖B所示。該同學的接種方法是_________________；推測同學甲用此方法接種時出現圖B結果可能的操作失誤是___________________；在接種前，為檢測培養基平板滅菌是否合格，應進行的操作是_________________________。

（3）同學乙也按照同學甲的接種方法進行了過程④的操作：將1mL樣品稀釋100倍，在3個平板上分別接入0．1mL稀釋液。乙同學每隔24h統計一次菌落數目，選取菌落數目穩定時的記錄作為結果，理由是_______________。經統計，3個平板上的菌落數分別為56、58和57。據此可得出每升樣品中的活菌數為___________________。

（4）步驟⑤后取樣測定石油含量的目的是_______________________。

Answer 1

【答案】高壓蒸汽滅菌 石油是唯一碳源 稀釋涂布平板法 涂布不均勻 隨機選取若干滅菌后的空平板先行培養一段時間 防止因培養時間不足而遺落菌落數目 篩選出分解石油能力最好的細菌

【解析】

1、微生物常見的接種的方法：

①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養.在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落.

2、分析圖B：圖B采用的是稀釋涂布平板法，但涂布不均勻。

（1）培養基通常使用高壓蒸汽滅菌法滅菌。該實驗的目的是為了分離和純化高效分解石油的細菌，因此步驟③與步驟②中培養基成分相比，最大的區別是石油是唯一碳源。

（2）圖B采用的接種方法是稀釋涂布平板法，出現圖B結果可能的操作失誤是涂布不均勻。在接種前，可隨機選取若干滅菌后的空平板先行培養一段時間，用來檢測培養基平板滅菌是否合格。

（3）為防止因培養時間不足而遺落菌落數目，應選取菌落數目穩定時的記錄作為結果。將1mL樣品稀釋100倍，在3個平板上分別接人0.1mL稀釋液；經適當培養后，3個平板上的菌落數分別為56、58和57。據此可得出每升樣品中的活菌數為（56+58+57）÷3÷0.1×1000×100=5.7×107個。

（4）步驟⑤后取樣測定石油含量的目的是篩選出分解石油能力最強的細菌。