Question

【題目】某生物實驗小組將酵母菌接種到裝有10mL液體培養基的試管中，通氣培養并定時取樣計數，然后繪制增長曲線。圖1是小組成員用血細胞計數板觀察到的培養結果（樣液稀釋10倍，血細胞計數板規格1mm×1mm×0.lmm），圖2曲線a、b是兩批次酵母菌培養的結果。分析回答問題。

（1）取樣時應先振蕩試管，原因是________。制片時應該在蓋蓋玻片________（選填“前”“后”）滴加樣液。

（2）在計數前常采用臺盼藍染液染色，若細胞被染成藍色，則_________（選填“需要”“不需要”）計數。計數時若圖1雙線邊內有4個細胞為藍色，此時試管中酵母菌數量約為________個。

（3）比較圖2中時兩批次培養的種群增長速率、種內斗爭的強度以及時兩批培養液中營養物質的剩余量依次是________、________、________（選填“a>b” “a=b”“a<b”）

（4）若在后繼續培養，最終發現種群的數量均會下降，可能的原因有____________。

Answer 1

【答案】使酵母菌分布均勻 后 不需要 a>b a<b a>b 營養物質過度消耗，有害代謝產物大量積累，PH值不適宜

【解析】

采用抽樣檢測法使用血球計數板對酵母菌進行計數，在計數時應從以下幾方面注意：

1.每天同一時間，各組取出本組的試管，用血球計數板計數酵母菌個數，并作記錄，連續觀察7天。

2.從試管中吸出培養液進行計數之前，要將試管輕輕震蕩幾下，這樣使酵母菌分布均勻，防止酵母凝聚沉淀，提高計數的代表性和準確性，求得的培養液中的酵母菌數量誤差小。

3.血細胞計數板計數時，應先放置蓋玻片，在蓋玻片的邊緣滴加培養液，待培養液從邊緣處自行滲入計數室，吸去多余培養液，再進行計數。如果一個小方格內酵母菌過多，難以數清，應當對培養液進行稀釋以便于酵母菌的計數。

4.對于壓在方格界線上的酵母菌應當計數同側相鄰兩邊上的菌體數，一般可采取數上線不數下線，數左線不數右線的原則處理，另兩邊不計數。

5.計數一個樣品要從兩個計數室中計得的平均數值來計算，對每個樣品可計數三次，再取其平均值。計數時應不時地調節焦距，才能觀察到不同深度的菌體，按公式計算每mL（或10mL）菌液中所含的酵母菌個數。

（1）根據以上分析可知，吸取培養液前應將培養瓶輕輕振蕩，使酵母菌分布均勻，防止酵母凝聚沉淀，提高計數的代表性和準確性。血細胞計數板計數時，應先放置蓋玻片，在蓋玻片的邊緣滴加培養液，待其自行滲入計數室，吸去多余培養液，再進行計數。

（2）由于活細胞具有選擇透過性，不會被臺盼藍染液染色，若細胞被染成藍色，則該酵母菌細胞為死細胞，不需要進行計數，計數時若圖1雙線邊內有4個細胞為藍色，識圖分析可知圖中雙邊線內16個小方格中共有活動酵母菌為20，則此時試管中酵母菌數量約為20÷16×400×10×10×1000÷0.1=5×108個。

（3）識圖分析圖2可知，曲線a、b均為S型增長曲線，在時兩批次培養的種群增長曲線中a正處于K/2時，此時增長速率最大，而b曲線此時種群數量大于K/2，因此其增長速率已經小于K/2時的增長速率，故a＞b，而種內斗爭的強度此時a＜b；由圖2可知，曲線b達到K值較快，而a曲線達到K值需要的時間較長，即增長過程緩慢，因此b曲線達到K值時剩余的營養物質的量少于a，即營養物質剩余量a＞b。

（4）若在后繼續培養，由于受到營養物質的限制，導致營養物質過度消耗，且有害代謝產物會大量積累，PH值不適宜等，最終使得種群的數量均會下降。