Question

【題目】以下是生物學(xué)技術(shù)制備抗體的兩個(gè)途徑模式簡(jiǎn)圖。

（1）上圖中過程①的完成采用的方法有 ，依據(jù)的生物學(xué)原理 ；

（2）過程④要用到的酶是 ，過程⑥進(jìn)行時(shí)一般用 處理細(xì)胞，使其處于 。

上圖中的質(zhì)粒本身含有氨芐青霉素抗性基因和M、N兩種限制酶（兩種酶切割序列完全不同）切割位點(diǎn)。若用限制酶M和N切割，通過凝膠電泳分離，分析得如下表。

分子量（kb）	1．0	2．0	3．0	4．0	5．0	6．0	7．0	8．0	9．0	10．0
酶M	+	+	+
酶N	+	+
酶M+酶N	+	+	+	+	+

凝膠電泳結(jié)果（１kb=1000對(duì)堿基，+表示檢測(cè)到該片段的存在

（3）該質(zhì)粒長(zhǎng)度為 kb，在該質(zhì)粒中，M酶與N酶的切割點(diǎn)分別有 、 個(gè)。

（4）氨芐青霉素抗性基因的作用是 。

（5）在表達(dá)載體中，啟動(dòng)子的作用是 識(shí)別和結(jié)合的部位，驅(qū)動(dòng)V1基因的轉(zhuǎn)錄。

Answer 1

【答案】（1）用聚乙二醇（PEG）（滅活的病毒） 細(xì)胞膜具有流動(dòng)性

（2）逆轉(zhuǎn)錄酶 鈣離子 感受態(tài)

（3）16 3 2

（4）作為標(biāo)記基因（鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將有目的基因的受體細(xì)胞篩選出來）

（5）RNA聚合酶

【解析】

試題分析：（1）誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有三種：生物方法（滅活的病毒）、化學(xué)方法（聚乙二醇PEG）、物理方法（離心，震動(dòng)，電刺激），其原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性；

（2）過程④是逆轉(zhuǎn)錄，要用到的酶主要有逆轉(zhuǎn)錄酶、DNA聚合酶；將基因表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌之前，一般要先用Ca2+處理細(xì)胞，使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，這種細(xì)胞稱為感受態(tài)細(xì)胞，這種方法就稱為感受態(tài)法；

（3）M酶將質(zhì)粒切成三段，分別為1kb、5kb、10kb，因?yàn)橘|(zhì)粒為環(huán)狀DNA，要切成三段就一定要有三個(gè)切點(diǎn)，共有16kb；N酶將質(zhì)粒切成二段，分別為7kb、9kb，應(yīng)有二個(gè)切點(diǎn)，共有16kb；

（4）氨芐青霉素抗性基因在基因工程作為標(biāo)記基因，用來鑒別和篩選含有目的基因的細(xì)胞；

（5）在表達(dá)載體中，啟動(dòng)子的作用是使RNA聚合酶與啟動(dòng)子結(jié)合，驅(qū)動(dòng)V1基因轉(zhuǎn)錄出mRNA。