Question

【題目】為了調(diào)查自來(lái)水的質(zhì)量情況，某研究小組對(duì)自來(lái)水水樣中的細(xì)菌含量進(jìn)行了測(cè)定，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）用錐形瓶取水樣前，可采用____法對(duì)錐形瓶滅菌。制備固體培養(yǎng)基的步驟是：計(jì)算、稱量、溶化、滅菌、___ 。

（2）自來(lái)水水樣需用____進(jìn)行梯度稀釋后再涂布平板，培養(yǎng)結(jié)果如圖所示，推測(cè)該同學(xué)可能的操作失誤是____。能據(jù)菌落數(shù)推測(cè)樣品中的活菌數(shù)的原因是____。

（3）測(cè)定自來(lái)水中細(xì)菌的含量除采用上述方法外，還可以用____法對(duì)菌落數(shù)進(jìn)行測(cè)定。為鑒別水樣中大腸桿菌，培養(yǎng)基中還應(yīng)加入的物質(zhì)是____。

（4）經(jīng)基因工程改造后的大腸桿菌可以生產(chǎn)出耐受性較好的堿性蛋白酶，目前可以采用固定化酶技術(shù)多次重復(fù)使用酶以降低成本。一般來(lái)說(shuō)，酶更適合采用____法固定化。

Answer 1

【答案】高壓蒸汽滅菌或干熱滅菌 倒平板 無(wú)菌水 涂布平板時(shí)涂布不均勻 當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，一個(gè)菌落來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌 濾膜 伊紅美藍(lán) 化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法

【解析】

1、制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的步驟是計(jì)算→稱量→熔化→滅菌→倒平板。

2、稀釋涂布法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，在適宜條件下培養(yǎng)。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落。

（1）在微生物的培養(yǎng)過(guò)程中，對(duì)錐形瓶滅菌可用高壓蒸汽滅菌或干熱滅菌。制備固體培養(yǎng)基的步驟是：計(jì)算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。

（2）為防止雜菌污染，自來(lái)水水樣需用無(wú)菌水進(jìn)行梯度稀釋后再涂布平板。圖中菌落分布不均勻，由此推測(cè)該同學(xué)接種時(shí)可能的操作失誤是涂布不均勻。當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)，單個(gè)細(xì)胞可形成單個(gè)菌落，即一個(gè)菌落來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌，所以可根據(jù)平板上的菌落數(shù)推測(cè)樣品中的活菌數(shù)。

（3）測(cè)定自來(lái)水中細(xì)菌的含量還可以用濾膜法對(duì)菌落數(shù)進(jìn)行測(cè)定。為鑒別水樣中大腸桿菌，培養(yǎng)基中還應(yīng)加入的物質(zhì)是伊紅美藍(lán)，在該培養(yǎng)基上，大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)黑色，可以根據(jù)培養(yǎng)基上黑色菌落的數(shù)目，計(jì)算出大腸桿菌的數(shù)量。

（4）由于酶分子較小，易從包埋材料中漏出，所以酶的固定化常用化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法，而不用包埋法。