Question

【題目】下圖1是某學生重復艾弗里證明DNA是遺傳物質實驗的其中一組實驗；下圖2是基因工程中運用影印法將培養基A上的菌落按原來方向印在培養基B上，以檢測重組質粒是否導入大腸桿菌的示意圖。回答下列問題：

（1）圖1、圖2的培養結果顯示，兩實驗中使用的均為________(填物理狀態）培養基。

（2）在配制圖2中的培養基時，除考慮營養、pH、滲透壓等條件外，還要考慮在培養基A和B中加入____________(填“相同”或“不同”）種類的抗生素。在配制培養基和倒平板的過程中，下列選項需要的有__________(填序號：①酒精燈，②接種環，③培養皿）。

（3）培養基滅菌是避免雜菌污染的有效途徑之一。適用于圖1、圖2所示培養基的滅菌方法是_______；接種前還需檢測滅菌效果，方法是將未接種的培養基置于恒溫箱中，在適宜溫度下培養一段時間，觀察培養基上________________。

（4）實驗證明，上述兩項實驗中R型菌和大腸桿菌的轉化率都很低，為獲得圖1、圖2所示的培養結果，一是要設法提高圖1中S型菌的_________；二是要使用恰當的方法接種。兩實驗都不能用稀釋涂布平板法接種，而應采用菌液直接涂布平板和影印法接種肺炎雙球菌和大腸桿菌，理由是__________。接種培養4天后，可通過觀察菌落的形態特征來識別肺炎雙球菌和大腸桿菌。

Answer 1

【答案】 固體 不同 ② 高壓蒸汽滅菌 是否有菌落產生 DNA純度 稀釋會導致菌種數量極少而無法觀察到轉化成功的菌落

【解析】

據圖分析，圖1中R型菌的培養基中加入了R型菌和S型菌DNA，結果是培養基上同時出現了R型菌和S型菌，說明S型菌DNA將R型菌轉化為S型菌；圖2是基因工程中運用影印法將培養基A上的菌落按原來方向印在培養基B上，以檢測重組質粒是否導入大腸桿菌的示意圖，培養基B中應該加入了相應的抗生素檢測重組質粒是否導入了受體細胞，結果是1、2、3生存下來了，而4消失了，說明前三者導入了重組質粒，而后者沒有。

（1）從圖1、圖2可以看出，兩實驗中使用的都是固體培養基。

（2）要檢測重組質粒是否導入大腸桿菌，檢測的依據一般是重組質粒的抗性發生了改變，因此在培養基A和培養基B中應加入不同種類的抗生素。在配制含瓊脂的培養基和倒平板的過程中，不需要接種環（②）。

（3）對培養基滅菌一般采用高壓蒸汽滅菌法；接種前需要檢測滅菌效果，其方法是進行空白對照，將未接種的培養基置于恒溫箱中，在適宜溫度下培養一段時間，觀察培養基上是否有菌落產生。

（4）上述兩項實驗中R型菌和大腸桿菌的轉化率都很低，為獲得圖1、圖2所示的培養結果，一是要提高圖1 中S型菌的DNA純度；二是要使用恰當的方法接種，不選用平板劃線法和稀釋涂布平板法，而采用不加稀釋的涂布平板法接種肺炎雙球菌和大腸桿菌，是因為這兩種方法都可能因稀釋后菌種數量極少而無法觀察到轉化成功的菌落。