Question

【題目】回答下列Ⅰ、Ⅱ兩個(gè)小題。

Ⅰ.逆轉(zhuǎn)錄病毒載體是一種表達(dá)型質(zhì)粒，結(jié)構(gòu)如圖所示。圖上的“逆轉(zhuǎn)錄病毒序列”可以整合到動(dòng)物細(xì)胞的染色體上，不斷地表達(dá)其攜帶的目的基因。(E、F、H分別為限制酶E、F、H的酶切位點(diǎn))。

(1)逆轉(zhuǎn)錄的模板是________________，原料是_________________________________。

(2)在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，目的基因應(yīng)插入到該質(zhì)粒的位置是________________，此過程需使用的酶是____________________________。為了篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌，一般需要用添加________________的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。獲取大量重組質(zhì)粒后，將其再轉(zhuǎn)入到某種哺乳動(dòng)物細(xì)胞中，可獲得大量重組逆轉(zhuǎn)錄病毒。

Ⅱ.如圖為培育轉(zhuǎn)基因小鼠基本過程的示意圖。請回答下列問題：

(3)若A為重組質(zhì)粒溶液，將其導(dǎo)入原核期受精卵的方法是__________________，若A為重組逆轉(zhuǎn)錄病毒，還可采取________________方法。

(4)小鼠出生后可從其尾巴提取_____________分子，通過____________________方法，可檢測出攜帶目的基因的小鼠。

(5)若目的基因進(jìn)入細(xì)胞后插入在一條染色體DNA上，那么獲得轉(zhuǎn)基因純合子小鼠的方法是_________________________________________。

Answer 1

【答案】RNA (四種)脫氧核苷酸 F(逆轉(zhuǎn)錄病毒序列) 限制酶和DNA連接酶 抗生素A 顯微注射(法) 感染(侵染) DNA DNA分子雜交(或核酸分子雜交) 轉(zhuǎn)基因小鼠間相互交配(或雜交)

【解析】

分析題圖：圖示為一種表達(dá)型質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)示意圖，該質(zhì)粒含有E、F、H三種限制酶的酶切位點(diǎn)；含有抗生素A抗性基因，可作為標(biāo)記基因；含有“逆轉(zhuǎn)錄病毒序列”，該序列可以整合到動(dòng)物細(xì)胞的染色體上，不斷地表達(dá)其攜帶的目的基因，獲得大量重組逆轉(zhuǎn)錄病毒。

（1）逆轉(zhuǎn)錄是以RNA為模板合成DNA的過程，所需要的模板為RNA，原料為四種脫氧核苷酸。

（2）由圖可知，在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，目的基因應(yīng)插入到該質(zhì)粒的位置是F，此過程需使用的酶是限制酶和DNA連接酶。為了篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌，一般需要用添加抗生素A的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，因?yàn)槠錁?biāo)記基因是抗生素A抗性基因。

（3）如A為重組質(zhì)粒溶液，將其導(dǎo)入動(dòng)物受精卵的方法是顯微注射技術(shù)。

（4）小鼠出生后可從其尾巴提取DNA分子，通過DNA分子雜交，可檢測出攜帶目的基因的小鼠。

（5）若目的基因進(jìn)入細(xì)胞后插入在一條染色體DNA上，那么獲得轉(zhuǎn)基因純合子小鼠的方法是轉(zhuǎn)基因小鼠間相互交配。