Question

【題目】已知SARS是由一種RNA病毒感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康復后的血清中有抗S蛋白的特異性抗體。某研究小組為了研制預防SARS病毒的疫苗，開展了前期研究工作。其簡要的操作流程如下：

（1）實驗步驟①所代表的反應過程是________________。

（2）步驟②構建重組表達載體A和重組表達載體B必須使用限制性酶和________________酶，后者的作用是將用限制酶切割的________________和_______________連接起來。

（3）如果省略步驟②而將大量擴增的S基因直接導入大腸桿菌，一般情況下，不能得到表達的S蛋白，其原因是S基因在大腸桿菌中不能_______________，也不能_________________________。

（4）為了檢驗步驟④所表達的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同的免疫反應特性，可用_________________________與_____________________ 的血清進行抗原—抗體特異性反應實驗，從而得出結論。

（5）步驟④和⑥的結果相比，原核細胞表達的S蛋白與真核細胞表達的S蛋白的氨基酸序列_______（相同，不同），根本原因是______

Answer 1

【答案】 逆轉錄 DNA連接 載體 S基因 復制 合成S基因的mRNA 大腸桿菌中表達的S蛋白 SARS康復病人 相同 表達蛋白質所用的基因相同

【解析】試題分析：本題主要考查基因工程。要求學生熟知目的基因的獲取、基因表達載體的構建方法、目的基因的檢測與鑒定方法。

（1）據圖可知，過程①是以RNA為模板合成DNA的過程，即是逆轉錄。

（2）基因表達載體的構建需要使用限制酶和DNA連接酶；DNA連接酶的作用是將目的基因（S基因）和運載體連接在一起。

（3）若把S基因直接導入大腸桿菌，S基因很難把自己整合到細菌的DNA上，這樣的S基因是無法復制和轉錄（合成S基因的mRNA）的；

（4）要想檢驗大腸桿菌中表達的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同作用，必須要獲得病毒S蛋白，根據免疫知識，SARS康復病人血清應該含有該物質。檢測蛋白質的方法是抗原—抗體雜交，即將大腸桿菌中表達的S蛋白與SARS康復病人血清（含有抗S蛋白的抗體）結合。

（5）由于基因相同，因此所表達的蛋白質中氨基酸序列也應相同。