Question

【題目】將醋酸菌突變體中與耐酸有關的ALDH基因導入優良醋酸菌中，選育出高發酵速率、耐酸的醋酸菌，用于果醋生產。請分析回答下列問題：

（1）對含有ALDH基因的DNA與質粒切割后，通過__________酶連接形成重組質粒。

（2）下圖表示溫度、乙醇濃度對該醋酸菌產酸量的影響。

①據圖分析，研究不同酒精濃度下的最高產酸量時，最好把溫度控制為__________℃。

②酒精發酵后通過出料口檢測酒精濃度，將發酵液中酒精濃度調節到_________左右才接種醋酸菌，較高的酒精濃度會使產酸量下降，不適宜接種，原因是_________。

③在果酒釀造過程中如果果汁滅菌不嚴格含有醋酸菌，在酒精發酵旺盛時，醋酸菌_________（填“能”或“不能”）將果汁中的糖發酵為醋酸，理由是_________。

（3）為獲得耐酸的醋酸菌，可用稀釋涂布平板法接種于__________的培養基進行篩選。此方法也可用來統計樣品中活菌的數目，統計結果往往比實際數值_________（填“偏低”或“偏高”）。

Answer 1

【答案】DNA連接 35（或30-35） 4% （較）高濃度的酒精會抑制醋酸菌的生長和代謝 不能 醋酸菌是好氧細菌，而果酒發酵為無氧環境，醋酸菌無法生存 含高濃度醋酸的 偏低

【解析】

本題是運用基因工程技術選育出高發酵速率、耐酸的醋酸菌，用于果醋生產。據圖圖1中醋酸菌的最適發酵溫度是35℃，圖2中乙醇濃度為4%時醋酸菌的產酸量最高。據此分析作答。

（1）用基因工程選育醋酸菌時，對含有ALDH基因的DNA與質粒用同種限制酶切割后，通過基因針線即DNA連接酶形成重組質粒。

（2）①圖1中醋酸菌的最適發酵溫度是35℃，所以最好把溫度控制為35（30-35）℃。

②圖2中乙醇濃度為4%時醋酸菌的產酸量最高，所以解析果醋發酵時需要將發酵液中酒精濃度調節到4%左右才接種醋酸菌。否則高濃度的酒精會抑制醋酸菌的生長和代謝，導致產酸量下降。

③在果酒釀造過程中如果果汁滅菌不嚴格含有醋酸菌，在酒精發酵旺盛時，醋酸菌不能將果汁中的糖發酵為醋酸，理由是醋酸菌是好氧細菌，而果酒發酵為無氧環境，醋酸菌無法生存。

（3）為獲得耐酸的醋酸菌，可用稀釋涂布平板法接種于含高濃度醋酸的培養基進行篩選。此方法也可用來統計樣品中活菌的數目，統計結果往往比實際數值偏低，其原因是當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。