Question

【題目】圖是利用基因工程和植物組織培養技術獲得新植株的過程，請回答：

（1）農桿菌的 Ti 質粒分布在細菌細胞的___________中，圖中 A 表示 Ti 質粒上的___________，且 A 可轉移至受體細胞，并整合在___________ 上。Ti 質粒上必須含有___________ ，以便檢測受體細胞中是否導入目的基因。

（2）C→D 過程，需要使用_____處理，使 D 處于一種能吸收周圍環境中 DNA 分子的生理狀態， 這種細胞稱為_____。

（3）在植物中，一些分化的細胞，經過有關___________的誘導，脫分化為具有___________ 能力的薄壁細胞，進而形成植物的愈傷組織。愈傷組織在一定的培養條件下，又可以再分化出幼根和芽，形成完成的小植株。在此培養過程中，要求無菌操作的原因是：_____________________________

Answer 1

【答案】細胞質 T-DNA 染色體的DNA 標記基因 Ca2+（CaCl2） 感受態細胞 （植物）激素 分生 ①雜菌會與培養物爭奪營養 ②雜菌繁殖過程中會產生有毒的物質，使培養物迅速死亡

【解析】

分析題圖：A是表示 Ti 質粒上的T-DNA，B是攜帶外源基因的DNA片段，C是含目的基因的重組Ti 質粒，D是含重組Ti 質粒的農桿菌，E是受體細胞。

（1）農桿菌的Ti質粒是擬核外環狀DNA分子，分布在細菌細胞的細胞質，圖中A表示Ti質粒的T-DNA；它可轉移至受體細胞，并整合在受體細胞的染色體的DNA上，Ti 質粒上必須含有標記基因，以便檢測受體細胞中是否導入目的基因。

（2）將目的基因導入微生物細胞常用方法是，用Ca2+處理微生物細胞，使其成為能吸收周圍環境中DNA分子的感受態細胞。將重組表達載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態細胞混合，在一定的溫度下促進感受態細胞吸收DNA分子，完成轉化過程。

（3）在植物中，一些分化的細胞，經過激素的誘導，可以脫分化為具有分生能力的薄壁細胞，進而形成植物的愈傷組織；培養要求無菌操作的原因是雜菌的生長一方面會與目標培養物競爭營養，從而使其失去營養；另一方面會產生大量對目標培養物有害的物質，導致其不能正常生長甚至死亡。