Question

【題目】重組人血小板生成素（rhTPO)是一種新發現的造血生長因子，如圖為通過乳腺生物發生器產生rhTPO的相關過程。請回答下列問題。

（1）構建重組質粒時選用的限制酶是____________，原因是__________________。重組質粒中的標記基因是___________，標記基因的作用是_________________________。

（2）通常采用__________技術將重組質粒導入受精卵，圖中所示的過程與胚胎工程相關的有_________(至少寫出兩個）。

（3）若檢測轉基因生物的DNA上是否插入了目的基因，檢測方法是___________技術，其次還需檢測目的基因____________，這是檢測目的基因是否發揮作用的第一步，最后檢測目的基因是否翻譯成蛋白質。

Answer 1

【答案】 HindⅢ和XhoⅠ SmaⅠ的酶切位點位于目的基因中間，如果用SmaⅠ切割，不能得到完整的目的基因（或用HndⅢ和XhoⅠ可以得到完整的目的基因) 抗卡那霉素基因 鑒別受體細胞中是否含有目的基因，以便篩選 顯微注射 體外受精、早期胚胎培養(動物細胞培養）、胚胎移植 DNA分子雜交 是否轉錄出mRNA

【解析】本題結合圖形考查基因工程和胚胎工程，要求考生理解相關知識的要點，把握知識間內在聯系，形成知識網絡結構的能力。

（1）結合題意分析圖形可知，構建重組質粒時選用的限制酶是HindⅢ和XhoⅠ，原因是SmaⅠ的酶切位點位于目的基因中間，如果用SmaⅠ切割，不能得到完整的目的基因，而用HndⅢ和XhoⅠ可以得到完整的目的基因；同時用HndⅢ和XhoⅠ還可以保證切割后的目的基因與質粒具有相同的末端，以便于在DNA連接酶的作用下形成重組質粒。由于使用HndⅢ和XhoⅠ切割質粒是會破壞質粒中的抗四環素基因而不會破壞抗氨芐青霉素基因，因此重組質粒中的標記基因是抗卡那霉素基因，標記基因的作用是鑒別受體細胞中是否含有目的基因，以便篩選。

（2）動物基因工程中，通常采用顯微注射技術將重組質粒導入受精卵；圖中所示的過程與胚胎工程相關的有體外受精、早期胚胎培養(動物細胞培養）、胚胎移植。

（3）若檢測轉基因生物的DNA上是否插入了目的基因，檢測方法是DNA分子雜交技術，其次還需檢測目的基因是否轉錄出mRNA，這是檢測目的基因是否發揮作用的第一步，最后檢測目的基因是否翻譯成蛋白質。