Question

【題目】在生產(chǎn)研究上，常常需要進行微生物的培養(yǎng)和計數(shù)。回答下列與微生物的培養(yǎng)與利用有關的問題

（1）下圖是利用______________法將微生物接種到固體培養(yǎng)基上，把混合的菌種逐步稀釋分散獲得______________菌落。接種后培養(yǎng)基應______________放在37℃恒溫培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（3）分析下面培養(yǎng)基的配方：NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO47H2O、KCl、H2O。若此培養(yǎng)基用于篩選尿素分解菌，則應除去上述培養(yǎng)基成分中的________，并加入______________和________物質(zhì)，以補充其生活所需的______________和________。培養(yǎng)基中加入酚紅作指示劑的原因是尿素分解菌能合成________將尿素分解為氨，使培養(yǎng)基pH發(fā)生改變，酚紅由黃變紅，使菌落周圍呈現(xiàn)紅色。

（4）三位同學用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中細菌數(shù)量。在對應稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，取0．2ml稀釋液涂布，得到以下統(tǒng)計結果：

甲同學涂布了1個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是260；

乙同學涂布了三個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是210、240和246，取平均值232；

丙同學涂布了三個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是21、212和256，取平均值163；

在三位同學的統(tǒng)計中，____________同學的統(tǒng)計結果是相對準確可信的。按照該同學的結果，每毫升原液中的菌體數(shù)是______________。用這種方法測得的菌體數(shù)比實際活菌數(shù)量______________。

（4）實驗結束后，使用過的培養(yǎng)基應該進行_____________處理后，才能倒掉。

Answer 1

【答案】

（1）平板劃線法 單個 倒置

（2）NaNO3 尿素 葡萄糖 氮源 碳源 （要求：前后對應） 脲酶

（3）乙 1．16×109 少

（4） 滅菌

【解析】

（1）由圖可知，其采取的是平板劃線法，該方法能把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。接種后培養(yǎng)基應倒置放在37℃恒溫培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（2）培養(yǎng)分解尿素的細菌，其氮源是尿素，所以培養(yǎng)基中要除去含氮物質(zhì)，即去除NaNO3，并加入尿素和葡萄糖，以提供氮源和碳源。尿素分解菌能合成脲酶將尿素分解為氨，使培養(yǎng)基pH發(fā)生改變，酚紅由黃變紅，使菌落周圍呈現(xiàn)紅色，所以培養(yǎng)基中要加入酚紅作指示劑。

（3）甲同學只涂布了1個平板，實驗數(shù)據(jù)說服力不夠 丙同學其中一個平板的計數(shù)結果與另兩個相差太遠，說明操作過程出現(xiàn)錯誤，數(shù)據(jù)缺乏正確性，所以乙同學的統(tǒng)計結果是相對準確可信的。在稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中測得平板上菌落數(shù)的平均值為23．4，那么每毫升樣品（涂布平板時所用稀釋液的體積為0．2mL） 中的菌落數(shù)是=106×23．2×1/0．2=1．16×109個。當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察的是一個菌落，因此用這種方法測定得密度偏低。

（4）實驗結束后，使用過的培養(yǎng)基應該進行滅菌處理后，才能倒掉。