Question

【題目】應用生物工程技術可以獲得人們需要的生物新品種或新產品。請回答下列有關生物工程的問題。

（1）基因工程中構建基因表達載體需要用到________酶和DNA連接酶，DNA連接酶中，__________可連接DNA的兩個末端。

（2）大腸桿菌PUC19質粒如圖所示。

Lacz基因是PUC19質粒上重要的標記基因，其表達產物能水解X-gal，進而使大腸桿菌菌落呈藍色。用EcoRl構建重組質粒，導入受體菌（不含LacZ基因和氨卡青霉素抗體基因）并進行檢測。下列敘述不正確的是_____（單選）

A.應用涂布法將受體菌群接種在培養基表面

B.培養基中應含有氨卡青霉素和X-gal

C.挑取菌落的接種環在操作前后都應該灼燒滅菌

D.應挑取培養基表面的藍色菌落進行擴大培養

（3）植物轉基因技術中，最常用的導入目的基因的方法是_____，其中需要的運載體是________，目的基因插入到該運載體的______中，以便使植物細胞得以轉化。這是______植物和裸子植物常用的一種基因轉化方法。

（4）動物基因工程中，一般把目的基因導入動物的______細胞中。

Answer 1

【答案】 限制性核酸內切酶 (限制酶） T4DNA連接酶 D 農桿菌轉化法 Ti質粒 T-DNA 雙子葉 受精卵

【解析】試題分析：基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取②基因表達載體的構建③將目的基因導入受體細胞④目的基因的檢測與鑒定。DNA重組技術至少需要三種工具：限制性核酸內切酶（限制酶）、DNA連接酶、運載體。基因表達載體主要由目的基因、標記基因、啟動子和終止子，其中標記基因的作用是為了鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來。

（1）在構建基因表達載體時要用到的工具酶有限制酶和DNA連接酶，T4DNA連接酶可連接DNA的兩個末端。

（2）由題意可知，受體菌必須均勻分布在培養基中，應用涂布法將受體菌群接種在培養基表面，A正確；氨芐青霉素抗性基因屬于標記基因，EcoRI的酶切位點位于LacZ基因上，因此培養基中應含有氨芐青霉素和X-gal，含有目的基因的大腸桿菌能在該培養基上生存，但不會出現藍色，B正確；為了防止雜菌污染，以及目的菌污染環境，因此挑取菌落的接種環在操作前后都應該灼燒滅菌，C正確；由于含有目的基因的大腸桿菌上存在氨芐青霉素抗性基因，而LacZ基因被破壞，所以應挑取培養基表面的氨芐青霉素抗性基因的菌落進行擴大培養，D錯誤。

（3）植物轉基因技術中，常用農桿菌轉化法將目的基因導入受體細胞，其中需要的運載體是農桿菌的Ti質粒，目的基因插入到該運載體的T-DNA中，以便使植物細胞得以轉化，這是雙子葉植物和裸子植物常用的一種基因轉化方法。

（4）動物基因工程中，一般把目的基因導入動物的受精卵細胞中。