Question

【題目】閱讀下列有關病毒的材料并回答題目。

Ⅰ．2019新型冠狀病毒，即“2019-nCoV”，為有包膜病毒。顆粒呈圓形或橢圓形，直徑50～200nm。顆粒表面有棒狀突起，使病毒表面看起來形如花冠，故而得名。2019-nCoV基因組長度為29．8Kb，為單股正鏈RNA，其5’端為甲基化帽子，3’端有多聚腺苷酸（PolyA）結構，可直接作為翻譯模板。截至2020年3月25日上午10時，世界范圍確診感染此病毒的人數已累計達到412461人。

（1）下列選項錯誤的是_____

A．細胞膜能控制物質進出，故該病毒只能侵染受損細胞，使人患病

B．由于沒有核糖體，這種病毒無法合成蛋白質，其包膜組成一定不含蛋白質

C．病毒的遺傳物質水解后可產生一分子核苷，一分子含氮堿基與一分子磷酸

D．此病毒的單股正鏈RNA，只有轉錄形成對應的負鏈RNA才能附著在細胞的核糖體上

（2）這種病毒的遺傳物質為_____，研究人員緊急研發了核酸檢測試劑盒，以此來檢測病毒，檢測此病毒的核酸可使用_______法。研究人員發現，病毒的中間宿主為蝙蝠，某些情況下，病毒可在不同動物身體內翻譯出基本相同的多肽鏈，這是因為_____。

（3）病毒入侵人體后，引起相關細胞分泌抗體，該抗體并不會與其他病癥的抗原結合，這體現了________，此原理也可應用于該病的檢測。若要用細胞工程的方法生產針對2019-nCoV上抗原的單克隆抗體，用到的技術有_________和_________。

（4）將2019-nCoV不穩定的RNA轉換成DNA后，技術人員常采用熒光定量PCR技術定量檢測樣本中病毒的核酸含量。其原理如圖：在PCR反應體系中每加入一對引物的同時，加入一個與某條模板鏈互補的熒光探針，當_________催化子鏈延伸至探針處，會水解探針，使熒光監測系統接受到熒光信號，即每擴增一次，就有一個熒光分子生成。反應最終的熒光強度與PCR起始狀態_________含量呈正相關。

Ⅱ．朊病毒是一種只含蛋白質而不含核酸的病原微生物。按圖示1→2→3→4進行實驗，驗證朊病毒侵染因子是蛋白質，題中所用牛腦組織細胞為無任何標記的活體細胞。

（1）本實驗采用的研究方法是______。

（2）從理論上講，經1→2→3→4實驗離心后上清液中______（填“能大量”或“幾乎不能”）檢測到32P，沉淀物中___________（填“能大量”或“幾乎不能”）檢測到32P，出現上述結果的原因是：_________。

（3）如果添加試管5，從試管2中提取朊病毒后先加入試管5同時添加35S標記的（NH4）235SO4，連續培養一段時間后，再提取朊病毒加入試管3，培養適宜時間后離心，檢測放射性應主要位于_______中，少量位于_______中，原因是：_____________。

（4）一般病毒的增殖同朊病毒之間的最主要區別是：一般的病毒侵染細胞是向宿主細胞提供________（物質），利用宿主細胞的_______________等物質進行增殖。

Answer 1

【答案】ABCD RNA 分子雜交 （幾乎）所有生物共用一套密碼子 抗體具有特異性 動物細胞培養 動物細胞融合 Taq酶 模板DNA 同位素標記法 幾乎不能 幾乎不能 朊病毒不含核酸只含蛋白質，蛋白質中磷含量極低，故試管2中提取的朊病毒幾乎不含32P 沉淀物 上清液 被35S標記的朊病毒（蛋白質），大部分進入牛腦組織細胞中，只有少量的朊病毒可能沒侵入牛腦組織細胞 核酸 核苷酸和氨基酸

【解析】

1、病毒不具有獨立代謝能力，只能寄生在活細胞中。據遺傳物質不同，可分為DNA病毒和RNA病毒。2019-nCoV的核酸為單股正鏈RNA，其5’端為甲基化帽子，3’端有多聚腺苷酸（PolyA）結構，可直接作為翻譯模板。

2、朊病毒不能獨立生活，在活細胞內才能增殖，所以要標記朊病毒需先培養帶標記的宿主細胞—牛腦組織細胞，再讓朊病毒侵染帶標記的牛腦組織細胞，完成對朊病毒的標記。因為朊病毒沒有核酸，只有蛋白質，蛋白質中磷含量極低，故離心后上清液和沉淀物中都幾乎不含32P；用35S標記的朊病毒侵入牛腦組織細胞，由于少量朊病毒不能侵染成功，所以放射性物質主要位于沉淀物中，上清液中含少量放射性物質。朊病毒是一類非正常的病毒，它不含有通常病毒所含有的核酸。

Ⅰ（1）A、細胞膜控制物質進出細胞的作用是相對的，2019-nCoV表面的刺突糖蛋白能與人體細胞表面ACE2 受體蛋白特異性結合，從而侵染細胞，2019-nCoV并不是只能侵染受損細胞，A錯誤；

B、病毒沒有核糖體，利用宿主細胞的核糖體合成蛋白質，2019-nCoV的包膜成分中含有蛋白質，其刺突糖蛋白能識別人體細胞膜上的受體，B錯誤；

C、2019-nCoV的核酸為單股正鏈RNA，即遺傳物質為RNA，初步水解可形成四種核糖核苷酸，徹底水解可形成核糖、磷酸和四種含氮堿基，C錯誤；

D、由題意可知，此病毒的單股正鏈RNA，可直接作為翻譯模板，所以可直接附著在宿主細胞的核糖體上進行翻譯，不需要轉錄形成對應的負鏈RNA，D錯誤。

故選ABCD。

（2）這種病毒只含RNA，故遺傳物質為RNA。利用試劑盒檢測病毒所利用的是分子雜交技術，其原理為堿基互補配對原則；因為（幾乎）所有生物共用一套密碼子，所以病毒可在不同動物身體內翻譯出基本相同的多肽鏈。

（3）抗體具有特異性，一種抗體只能和一種抗原發生特異性結合。單克隆抗體的制備過程中，需要將經過免疫的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合形成雜交瘤細胞，經過動物細胞培養并篩選后獲得能產生特異性抗體的雜交瘤細胞，并將該雜交瘤細胞進行體內或體外培養獲得單克隆抗體，所以該過程用到的技術有動物細胞培養和動物細胞融合。

（4）PCR技術中延伸DNA子鏈的酶為Taq酶。題干中提出“加入一個與某條模板鏈互補的熒光探針”，并且“每擴增一次，就有一個熒光分子生成”，因此反應最終的熒光強度與起始狀態模板DNA含量呈正相關。

Ⅱ（1）由圖可知，本實驗采用了同位素標記法。
（2）由于朊病毒不含核酸只含蛋白質，蛋白質中磷含量極低，故試管2中提取的朊病毒幾乎不含32P。因此，從理論上講，離心后上清液中幾乎不能檢測到32P，沉淀物中幾乎不能檢測到32P。
（3）經試管5中牛腦組織細胞培養出的朊病毒（蛋白質）被35S標記，提取后加入試管3中，35S隨朊病毒侵入到牛腦組織細胞中，因此放射性物質主要位于沉淀物中。同時會有少量的朊病毒不能成功侵入牛腦組織細胞，離心后位于上清液中，因此上清液中含少量放射性物質。
（4）一般病毒同朊病毒之間的最主要區別是：一般病毒侵入細胞是向宿主細胞提供核酸，利用宿主細胞的核苷酸和氨基酸合成自身的核酸和蛋白質。