Question

【題目】Ⅰ.（1）天然的玫瑰沒有藍色花，這是由于缺少控制藍色色素合成的基因B，而開藍色花的矮牽牛中存在序列已知的基因B，現用基因工程技術培育藍玫瑰，下列操作正確的是（______）

A.提取矮牽牛藍色花的mRNA，經過逆轉錄獲得互補的DNA，再擴增基因B

B.利甩限制性核酸內切酶從開藍色牽牛花的基因文庫中獲取基因B

C.利用DNA聚合酶將基因B與質粒連接后導入玫瑰細胞

D.將基因B直接導人大腸桿菌，然后感染并轉入玫瑰細胞

（2）干細胞是生物體生命進程中出現的一類未分化細胞，一旦需要，它可以分裂、分化形成各種組織干細胞，再進一步分化形成各種不荷的組織細胞。下列有關敘述中錯誤的是（______）

A.在適宜條件下,胚胎干細胞可以分化為多神組織

B.心臟干細胞分化形成心臟的過程表現了細胞的全能性

C.干細胞中含有本物種生物發育的全套遺傳物質

D.運用胚胎干細胞可以培育動物器官或組織，開創人類疾病治療的新方法

（3）美國科學家將熒光水母的一種物質注人白豬細胞中，然后將這些白豬的體細胞核植入黑豬的去核卵細胞中，最后將5枚重組卵放入黑豬的子宮內，產下的5只小豬中有4只小豬的嘴和蹄發出黃色熒光。下列相關敘述中，正確的是 （______）

A.產下的5只小豬性狀與卵供體黑豬嘴相似，部分性狀也可能與白豬相似

B.要提髙重組卵的成活率，對受體黑豬需要用雌激素進行超數排卵處理

C.導入熒光水母的某物質形碑的重組細啤，通過組織培養可形成新個體

D.注入白豬細胞的物質可能是熒光水母DNA，并已整合到白豬細胞核DNA中

Ⅱ.如圖為純種荷斯坦小奶牛的蘩殖過程，請據圖回答下列問題。

（1）從供體母牛體內獲取的卵母細胞，一般要在體外培養到_____________（時期）才能參與受精，從良種公牛體內獲取的精子要經過__________________________處理才能受精。

（2）體內受精和人工授精的區別之一是場所不同，體內受精的場所是_____________，早期胚胎所需的培養液中除了有水、無機鹽、維生素、核苷酸外，還需加入_____________等物質。

（3）如果培育轉基因荷斯坦奶牛，可采用_______________________技術將藥用蛋白基因導入到受精卵中，在檢側受體細胞中的染色體DNA上是否插入了目的基因時，常采用的方法是_____________技術，根據是否顯示出雜交帶進行鑒定。

（4）胚胎移植前要對受體母牛進行__________________________處理，胚胎能在受體母牛的子宮中成活，是因為_________________________________________________________________。

Answer 1

【答案】 A B D 減數第二次分裂中期（或MⅡ中期） 獲能 輸卵管 有機鹽、激素、氨基酸以及血清 顯微注射 DNA分子雜交 同期發情 受體對移入的外來胚胎基本不發生免疫排斥反應

【解析】試題分析：基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因（基因B）的獲取（從基因文庫中獲取、PCR技術體外擴增、人工合成）；②基因表達載體的構建；③將目的基因導入受體細胞；④目的基因的檢測與表達。胚胎干細胞簡稱ES或EK細胞，來源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的內細胞團），ES細胞在飼養層細胞上或在添加抑制因子的培養液中，能夠維持不分化的狀態；在培養液中加入分化誘導因子，如牛黃酸、丁酰環腺苷酸等化學物質時，就可以誘導ES細胞向分化，這為揭示細胞分化和細胞凋亡機理提供了有效的手段。動物核移植是指將動物的一個細胞的細胞核移入一個去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發育為動物個體，所以動物細胞核移植產生的動物的細胞核基因均來自供體，而細胞質基因來自受體；對受體用雌激素進行超數排卵，可獲得更多的卵細胞，對受體需要用促性腺激素進行同期發情處理。胚胎移植基本程序主要包括：①對供、受體的選擇和處理；②配種或人工授精；③對胚胎的收集、檢查、培養或保存；④對胚胎進行移植；⑤移植后的檢查。

Ⅰ.（1）要獲得矮牽牛中控制藍色色素合成的基因B，可提取矮牽牛藍色花mRNA，經逆轉錄獲得互補的DNA，再擴增基因B，A正確；控制藍色色素合成的基因B屬于真核生物的基因，而真核生物的基因一般不從基因文庫中獲取，B錯誤；目的基因與質粒的連接需要用DNA連接酶，而不是DNA聚合酶，C錯誤；目的基因需要和運載體連接后形成重組質粒再導入，而且應該用農桿菌進行感染，而不是大腸桿菌，D錯誤。

（2）在培養液中加入分化誘導因子，如牛黃酸、丁酰環腺苷酸等化學物質時，就可以誘導ES細胞分化為多種細胞和組織，A正確；心臟干細胞分化形成心臟的過程未表現細胞的全能性，細胞全能性是發育成完整生物體的能力，B錯誤；干細胞來自于受精卵的有絲分裂，含有本物種生物發育的全套遺傳物質，C正確；運用胚胎干細胞可以培植動物器官或組織，開創人類疾病治療的新方法，D正確。

（3）產下的5只小豬的核基因均來自供體，所以其性狀與核供體白豬最相似，部分性狀與黑豬相似，A錯誤；要提高重組卵移植的成活率，對受體黑豬需要用促性腺激素進行同期發情處理，B錯誤；動物細胞培養過程沒有脫分化和再分化過程，C錯誤；由于小豬表現為黃色熒光，說明注入白豬細胞的物質可能是熒光水母DNA，并已整合到白豬細胞核DNA中，D正確。

Ⅱ.（1）從供體母牛體內獲取的卵母細胞，一般要在體外培養到MⅡ中期才能參與受精；精子要經過獲能處理才能受精。

（2）體內受精和操作A（體外受精）的區別之一是場所不同，體內受精的場所是輸卵管；早期胚胎所需的培養液中除了有水、無機鹽、維生素、有機鹽、激素、氨基酸、核苷酸外，還需加入血清。

（3）將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；檢測目的基因是否導入受體細胞常用DNA分子雜交技術中，根據是否顯示出雜交帶進行鑒定。

（4）胚胎移植前要對受體母牛進行同期發情處理，使胚胎移植入相同的生理環境；胚胎能在受體母牛的子宮中成活，是因為受體對移入的外來胚胎基本不發生免疫排斥反應。