Question

【題目】大豆油脂中的化合物種類繁多，但主要成分是甘油三酯，常溫下一般為液態(tài)，不溶于水'易溶于有機(jī)溶劑，沸點(diǎn)較高。大豆種子中的油脂多與蛋白質(zhì)結(jié)合在一起，要提取純度較高的大豆油脂，往往需要將油脂成分與蛋白質(zhì)分離．芽孢桿菌是常見的蛋白酶產(chǎn)生菌，廣泛存在于土壤中，較易與其他細(xì)菌分離．研究人員利用芽孢桿菌分離大豆油脂與蛋白質(zhì)、以及提取大豆油的流程如下圖。回答下列問題：

（1）從土壤中分離芽孢桿菌，需要先將土壤樣品稀釋后再接種到固體培養(yǎng)基上，稀釋的目的是____，便于在平板上形成單個(gè)菌落。將接種后的平板培養(yǎng)一段時(shí)間后，可以根據(jù)__等菌落特征挑選出芽孢桿菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。

（2）將芽孢桿菌接種到含酪蛋白的固體培養(yǎng)基（酪蛋白使培養(yǎng)基呈不透明的乳白色）上，培養(yǎng)一段時(shí)間后，在某些菌落周圍會(huì)形成透明圈，原因是__。根據(jù)_____就可篩選出比較高效的目的菌株。

（3）將篩選到的目的菌株擴(kuò)大培養(yǎng)后，接種到含有大豆原料的液體培養(yǎng)基中進(jìn)行振蕩培養(yǎng)，振蕩的目的是____，培養(yǎng)過程中還需要嚴(yán)格控制____等條件（至少答出兩點(diǎn)）。

（4）芽孢桿菌在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時(shí)間后，將培養(yǎng)液進(jìn)行離心分離，在分離得到的培養(yǎng)液中加入乙醚完成過程①，這種提取大豆油脂的方法叫做____法。獲得純凈大豆油還需要完成過程②，該過程的主要目的是__________________。

Answer 1

【答案】將聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞 顏色、形狀、大小和隆起程度等 芽孢桿菌產(chǎn)生的蛋白酶將酪蛋白分解 透明圈的大小 增加培養(yǎng)液中的溶氧量、使菌種與培養(yǎng)液充分接觸 pH、溫度、培養(yǎng)液濃度 萃取 除去萃取劑（乙醚）

【解析】

稀釋平板計(jì)數(shù)是根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基上所形成的單個(gè)菌落，即是由一個(gè)單細(xì)胞繁殖而成這一培養(yǎng)特征設(shè)計(jì)的計(jì)數(shù)方法，即一個(gè)菌落代表一個(gè)單細(xì)胞。計(jì)數(shù)時(shí)，首先將待測(cè)樣品制成均勻的系列稀釋液，盡量使樣品中的微生物細(xì)胞分散開，使成單個(gè)細(xì)胞存在（否則一個(gè)菌落就不只是代表一個(gè)細(xì)胞），再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內(nèi)。經(jīng)培養(yǎng)后，由單個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖形成菌落，統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目，即可計(jì)算出樣品中的含菌數(shù)。此法所計(jì)算的菌數(shù)是培養(yǎng)基上長(zhǎng)出來的菌落數(shù)，故又稱活菌計(jì)數(shù)。

（1）稀釋的目的是將聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，便于在平板上形成單個(gè)菌落。通常是細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上（內(nèi)）生長(zhǎng)發(fā)育，形成以母細(xì)胞為中心的一團(tuán)肉眼可見的、有一定形態(tài)、構(gòu)造等特征的子細(xì)胞的集團(tuán)，稱之為菌落。可以根據(jù)顏色、形狀、大小和隆起程度等等菌落特征挑選出芽孢桿菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。

（2）芽孢桿菌產(chǎn)生的蛋白酶將酪蛋白分解，因此在芽孢桿菌周圍會(huì)形成透明圈。根據(jù)透明圈的大小就可篩選出比較高效的目的菌株，透明圈大的產(chǎn)生的蛋白酶多，分解作用顯著。

（3）液體培養(yǎng)基常振蕩培養(yǎng)，振蕩的目的是增加培養(yǎng)液中的溶氧量、使菌種與培養(yǎng)液充分接觸。為了使目的菌株更好地生長(zhǎng)，培養(yǎng)過程中還需要嚴(yán)格控制pH、溫度、培養(yǎng)液濃度等條件。

（4）在分離得到的培養(yǎng)液中加入乙醚（低沸點(diǎn)的有機(jī)溶劑），使芳香油充分溶解，稱為萃取法，然后蒸去低沸點(diǎn)的溶劑，剩下的就是大豆油脂。獲得純凈大豆油還需要完成過程②，該過程的主要目的是除去萃取劑（乙醚）。