Question

【題目】為了解決番木瓜環斑病毒引起番木瓜產量下降問題，我國研發了抗番木瓜環斑病毒轉基因番木瓜品種。下圖表示該抗番木瓜環斑病毒轉基因番木瓜的主要培育流程，請回答下列問題：

（1）番木瓜環斑病毒是一種變異性很強的RNA病毒。要想獲得番木瓜環斑病毒復制酶基因，可先將番木瓜環斑病毒的RNA經過____________形成cDNA，此過程遵循______________原則。

（2）在過程①的操作中，需要將番木瓜環斑病毒復制酶基因插入Ti質粒的____________，其原因是_____________________________________________________________________。在過程②的操作中，將重組Ti質粒轉入大腸桿菌中培養一段時間的目的是________________。

（3）給番木瓜細胞轉入外來基因，成功的概率是很低的，可采用___________________________技術來檢測愈傷組織中是否導入了外來基因。圖中過程④和⑤中芽和根的分化與________________（填激素名稱）有關。

Answer 1

【答案】逆轉錄 堿基互補配對 T-DNA T-DNA可攜帶目的基因進入受體細胞，并整合到受體細胞的染色體DNA上 大量復制目的基因 DNA分子雜交 生長素和細胞分裂素

【解析】

（1）考查基因工程育種的過程。圖示過程中①為獲得重組質粒的過程，該過程中需要限制酶和DNA連接酶、②為導入受體細胞的過程、③為脫分化、④為再分化生出芽的過程、⑤為再分化生出根的過程。④與⑤的分化方向與培養基中生長素和細胞分裂素的比例有關。
（2）在分子水平上的檢測目的基因有三種方法：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術。

（1）因為番木瓜環斑病毒是一種RNA病毒。要想獲得番木瓜環斑病毒復制酶基因，需先將番木瓜環斑病毒的RNA經過逆轉錄過程形成cDNA，此過程遵循堿基互補配對原則。
（2）在過程①的操作中，因為Ti質粒的T-DNA是可轉移的DNA，所以需要將番木瓜環斑病毒復制酶基因插入其中，進而T-DNA可攜帶目的基因進入受體細胞，并整合到受體細胞的染色體DNA上。在過程②的操作中，將重組Ti質粒轉入大腸桿菌培養一段時間的目的是為了獲得大量的目的基因，以便為后續的工作提供基礎。
（3）據分析知：本題中檢測目的基因是否成功導入采用DNA分子雜交技術來檢測。過程④和⑤中芽和根的分化與生長素和細胞分裂素有關。