Question

【題目】科學家利用生物工程技術，探究豬骨形態發生蛋白15(bmP15)基因具有表達特異性和示蹤干細胞誘導分化為類卵母細胞的潛能。通過擴增豬bmP15基因的啟動子片段與增強型綠色熒光蛋白（EGFP)基因構建表達載體，該工程技術基本流程如下圖。請回答下列問題：

（1）利用___________技術擴增bmP15基因的啟動子片段的前提，是要有一段已知核苷酸序列，以便合成__________。

（2）過程①中，應先用限制酶________________處理表達載體1,以便插入bmP15基因的啟動子構建表達載體2。

（3）過程②中，常采用___________技術將表達載體2成功導入受體細胞。

（4）培養受體細胞時，通常需在培養液中添加一定量的___________，以防污染；還需通入一定濃度的C02,目的是_________________。

（5）在實驗結果的基礎上，利用標記的_______基因作探針，與豬羊水干細胞的mRNA進行分子雜交，可進一步探究豬bmp基因特異性表達的原因。

（6）實驗說明，bmP15基因啟動子調控下EGFP基因在____________細胞表達。

Answer 1

【答案】 PCR 引物 XhoⅠ和HindⅢ(缺一不給分） 顯微注射 抗生素 維持培養液的pH EGFP 豬卵巢細胞和中國倉鼠卵巢（缺一不給分）

【解析】試題分析：本題考查基因工程，考查對基因工程的工具和操作流程的理解和識記。

（1）擴增bmP15基因的啟動子片段，需要利用PCR技術，該技術的前提是要有一段已知核苷酸序列，以便合成引物。

（2）過程①中，應先用限制酶XhoⅠ和HindⅢ處理表達載體1和bmP15基因，以獲取、插入bmP15基因的啟動子構建表達載體2。

（3）常采用顯微注射技術將表達載體2成功導入動物細胞。

（4）培養受體細胞時，通常需在培養液中添加一定量的抗生素，以防污染；還需通入一定濃度的C02，以維持培養液的pH。

（5）探究豬bmp基因特異性表達的原因，可利用標記的EGFP基因作探針，與豬羊水干細胞的mRNA進行分子雜交，檢測EGFP基因是否轉錄。

（6）實驗說明，在bmP15基因啟動子調控下EGFP基因在豬卵巢細胞和中國倉鼠卵巢細胞表達。