Question

【題目】基因工程

如圖為三種質粒和一個含目的基因的DNA片段，其中Ap為氨芐青霉素抗性基因，Tc為四環素抗性基因，lacZ為藍色顯色基因，EcoRⅠ（0.7Kb）、PvuⅠ（0.8Kb）等為限制酶及其切割位點與復制原點之間的距離。已知1kb=1000個堿基對的長度。請回答下列問題：

（1）基因工程中，為什么通常要選用質粒來運載目的基因？______。

（2）片段D為目的基因中的某一片段，則限制酶和DNA連接酶的作用部位依次是______、______（填圖中數字標號）。

（3）圖中能作為目的基因運載體最理想的質粒是______（填A/B/C），據圖分析，其他兩種質粒一般不能作為運載體的理由分別是______。

（4）如果將目的基因和質粒A構建重組質粒，然后再用EcoRI酶切這個重組質粒，進行電泳觀察，可出現長度分別為1.1kb和______kb的兩個片段，或者長度分別為______kb、______kb的兩個片段。

（5）動物基因工程通常以受精卵作為受體細胞的根本原因是______（單選）。

A、受精卵尺寸較大，便于DNA導入操作

B、受精卵細胞能使目的基因高效表達

C、受精卵基因組更易接受DNA的插入

D、受精卵可發育成動物個體

Answer 1

【答案】能自我復制，含有多個限制酶切割位點，具有特殊的標記基因 ② ② B 質粒A缺少標記基因，質粒C在用和目的基因相同的限制酶切割時，復制原點會被破壞 5.6 3.1 3.6 B

【解析】

分析題圖：如圖所示為三種質粒和一個含目的基因的DNA片段示意圖。圖中Ap為氨芐青霉素抗性基因，Tc為四環素抗性基因，lacZ為藍色顯色基因．EcoRⅠ（0.7Kb）、PvuⅠ（0.8Kb）等為限制酶及其切割的位點與復制原點的距離。片段D中，①是氫鍵，②是磷酸二酯鍵。

（1）質粒常作為運載體的原因是能自我復制，含有多個限制酶切割位點，具有特殊的標記基因。

（2）DNA聚合酶和DNA連接酶的作用部位均為磷酸二酯鍵，即圖中部位②。

（3）圖中質粒A缺少標記基因；質粒C在用和目的基因相同的限制酶切割時，復制原點會被限制酶切割，會影響重組質粒的自主復制。因此，能作為目的基因運載體最理想的質粒是B。

（4）目的基因和質粒B形成的重組質粒長度為2.7-0.1+（4.0-1.0）=5.6kb（質粒且切割后形成的大的片段+切割目的基因時形成的大片段）、0.1+1.0=1.1kb（質粒且切割后形成的小的片段+切割目的基因時形成的小片段）或2.7-0.1+1.0=3.6（質粒且切割后形成的大的片段+切割目的基因時形成的小片段）、0.1+3.0=3.1（質粒且切割后形成的小的片段+切割目的基因時形成的大片段）。

（5）動物基因工程通常以受精卵作為受體細胞的根本原因是受精卵細胞能使目的基因高效表達.