Question

【題目】利用基因編輯技術將病毒外殼蛋白基因導入豬細胞中，然后通過核移植技術培育基因編輯豬，可用于生產基因工程疫苗。下圖為基因編輯豬培育流程，請回答下列問題：

（1）對1號豬使用激素處理，使其超數排卵，收集并選取處在__________時期的卵母細胞用于核移植。

（2）采集2號豬的組織塊，用__________處理獲得分散的成纖維細胞，放置于37℃的CO2培養箱中培養，其中CO2的作用是____________________________。

（3）將重組胚胎移植到3號豬的子宮中，產出的基因編輯豬的性染色體來自于_________號豬。

（4）為檢測病毒外殼蛋白基因是否被導入4號豬并正常表達，可采用的方法有__________（填序號）。

①DNA測序 ②染色體倍性分析 ③體細胞結構分析 ④抗原—抗體雜交

Answer 1

【答案】減數第二次分裂中期 胰蛋白酶（或：膠原蛋白酶） 維持培養液的pH 2 ①④

【解析】

據圖分析，圖示基因編輯豬培育過程涉及的技術手段有轉基因技術、核移植技術、早期胚胎培養技術和胚胎移植技術等，利用轉基因技術將病毒外殼蛋白基因（目的基因）導入2號豬的體細胞核中，然后將2號豬的體細胞核移植到1號豬的去核卵母細胞中，再將重組細胞培養到囊胚并移植到3號豬的子宮中去，最后分娩產生了4號轉基因克隆豬。

（1）據圖分析可知，1號豬提供的是卵母細胞，對其注射促性腺激素可使其超數排卵，獲得的卵母細胞需要培養到減數第二次分裂中期才能進行核移植。

（2）將2號豬的組織塊分散成單個的成纖維細胞需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，該細胞的培養應在37℃含5%的CO2的恒溫培養箱中進行，其中CO2的主要作用是維持培養液的pH。

（3）據圖分析可知，核移植的細胞核來自于2號豬，因此產出的基因編輯豬的性染色體來自于2號豬。

（4）檢測病毒外殼蛋白基因（目的基因）是否導入4號豬，可以采用DNA分子雜交法檢測目的基因的序列；目的基因表達的最終產物是蛋白質（病毒外殼蛋白），可以利用抗原-抗體雜交法進行檢測，故選①④。