Question

【題目】列關于遺傳信息的傳遞與表達的問題

為了探究基因在高等動物體內不同發育階段和不同類型的細胞中表達的持異性，通常以綠色熒光蛋白編碼基因(GFP)作為目的基因構建轉基因動物。

（1）得GFP基因的方法一般包括____________和____________。

（2）使用限制酶PstI(識別序列和切割位點如圖A所示）切開GFP，其產生的末端應該為________。

（3）知圖B所示質粒經EcoRI和AatII聯合酶切后形成1.0kb和3.2 kb (1kb = 1000對堿基）兩種DNA片段，若將0.8 kb的單個基因插在質粒的PstI位點處，所形成的重組質粒用EcoRI和AatII聯合酶切后，能形成兩種DNA片段，其大小應分別為___________kb和___________kb。

（4）上述重組質粒導入小鼠受精卵雄性原核中的常規方法是______________________。

（5）上述受精卵移植發育而成且頭部發熒光的轉基因小鼠中，全身各種組織或細胞均含有的物質是______________________。

①GFP基因 ②GFPmRNA ③GFP蛋白

A.① B.①② C.②③ D.①②③

Answer 1

【答案】 從相關生物細胞中分離 人工化學合成 D 1.8 3.2 顯微注射 A

【解析】（1）獲得目的基因的方法有從相關生物細胞中分離和人工化學合成。

（2）根據圖20 A所給出的PstI識別序列和切割位點，使用限制酶PstI切開GFP，其產生的末端應該為與選項中D吻合，所以選D。

（3）根據圖20 B和題意“質粒經EcoRI和AatII聯合酶切后形成1.0kb和3.2 kb兩種DNA片段”可推知，其中所得到的1.0kb的DNA片段才是包含PstI酶切位點的片段。如果把目的基因（0.8kb）插入到PstI酶切位點處，則用EcoRI和AatII聯合酶切質粒后形成DNA片段大小分別為1.0+0.8=1.8kb和3.2kb。

（4）將目的基因導入動物受精卵的常用方法是顯微注射法。

（5）轉基因小鼠是由含GFP基因的受精卵發育而成，所以該轉基因小鼠的全身各種組織或細胞均含有GFP基因，但由該基因控制合成的GFPmRNA和GFP蛋白卻只在小鼠的頭部特定細胞內才表達含有。