Question

【題目】酵母菌種群數量的增長與實驗條件密切相關。科研人員試圖研究酵母菌接種量和溶氧量對酵母菌種群數量增長的影響。 設計以下實驗:

1．選擇生長旺盛的酵母菌為實驗材料，用移液器吸取設定的接種量（0．5mL、1．00mL、1．5mL） ，分別接種入相同體積的同種液體培養基。震蕩搖勻，吸取酵母菌懸液觀察計數作為初始值。將接種后的錐形瓶置于不同轉速的搖床中，28℃恒溫培養。

2．將錐形瓶中的培養液振蕩搖勻，用吸管每隔2h取樣1次，共取5 次。

3．取清潔干燥的血球計數板制作裝片，先用低倍鏡找到計數室，然后換成高倍鏡觀察計數。

4．記錄測量結果，繪制相關曲線，結果如下圖

分析圖中數據，回答下列問題：

（1）結果要分析： 培養液中 的濃度。

（2）在實驗實施過程中，一般要先采用 的方法對培養基進行滅菌。若制備裝片時，將清潔干燥的血球計數板先在計數室上滴1小滴酵母菌液，靜置5 min再蓋上蓋玻片，測量的結果會 。

（3）若本實驗使用的計數板規格如右圖，在計數時一般采用 法計數。

在實驗中，最初計數時發現所選取的樣方中方格酵母菌總數為零，這時正確的做法是：

A．將裝片清洗干凈，重新制備裝片進行計數

B．將樣液稀釋后重新進行制備裝片并計數

C．尋找有酵母菌的中方格，然后取其平均值計數

D．直接統計中間整個大方格中的細胞總數

（4）分析實驗數據圖，可以發現條件為 時測得種群密度最高，此時的酵母菌培養液不適合用來制作固定化酵母，原因是 。適合制作固定化酵母的酵母菌培養液條件為 。

Answer 1

【答案】

（1）接種量 氧氣

（2）高壓蒸汽滅菌 偏高

（3）五點取樣法 D

（4）轉速250r/min，接種量為1．5mL,培養第六個小時 種群達到峰值后，由于營養大量消耗、代謝產物增加，酵母菌大量死亡影響固定化酵母的活性 轉速230r/min，接種量為1．5mL,培養第8個小時

【解析】

（1）要研究酵母菌接種量和溶氧量對酵母菌種群數量增長的影響，因此自變量為酵母菌接種量和溶氧量，因此結果要分析接種量培養液中的氧氣濃度。

（2）對培養基要用高壓蒸汽滅菌法對其進行滅菌，先將培養液滴加到血球計數板的計數室中再蓋上蓋玻片計數，由于已加入的液滴的表面張力作用使其未能嚴密的蓋到計數板表面上，使計數室內的體積增大，從而使計數結果偏高。

（3）血球計數板計數時一般采用五點取樣法，已減少誤差。所選取的樣方中方格酵母菌總數為零，可以直接統計中間整個大方格中的細胞總數。

（4）由曲線結果可知，條件為250r/min，接種量為1．5mL，培養第六個小時，測得種群密度最高。制作固定化酵母，要保持酵母活性高，但當種群達到峰值后，由于營養大量消耗、代謝產物增加，酵母菌大量死亡，酵母菌的活性減低，因此不適合做固定化酵母細胞。種群數量少，適合做固定化酵母細胞，因此適合制作固定化酵母的酵母菌培養液條件為轉速230r/min，接種量為1．5mL,培養第8個小時。