Question

【題目】回答下列(一)、(二)小題：

(一)高溫淀粉酶在大規模工業生產中有很大的實用性。研究者從熱泉中篩選了高效產生高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過程如下圖所示。

(1)Ⅰ號培養基從物理狀態來看，屬于固體培養基，配制時要加入__________作為凝固劑；從用途來看屬于選擇培養基，應以________作為唯一碳源。

(2)配制固體培養基的基本步驟是________。

A．計算、稱量、倒平板、融化、滅菌

B．計算、稱量、融化、倒平板、滅菌

C．計算、稱量、融化、滅菌、倒平板

D．計算、稱量、滅菌、融化、倒平板

(3)融化時燒杯中加入瓊脂后要不停地________，防止瓊脂糊底引起燒杯破裂。對培養基滅菌的方法一般為______________。

(4)①過程是________，②過程所使用的接種方法是________法。

(5)部分嗜熱菌在Ⅰ號培養基上生長時可釋放_______分解培養基中的淀粉，在菌落周圍形成透明圈，挑選相應的菌落，接種到Ⅱ號培養基進一步分離純化后，再對菌種進行_______培養。

(二)科學家通過基因工程成功培育出能抗棉鈴蟲的棉花植株——抗蟲棉，其過程大致如下圖所示，據圖回答下面的問題：

(1)Ti質粒是農桿菌中的一種質粒，其上有T－DNA，把目的基因插入Ti質粒的T－DNA中是利用T－DNA__________________________________的特性。

(2)抗蟲基因轉入普通棉花植株內并成功表達的過程，在基因工程中稱為________。

(3)將目的基因導入受體細胞中的方法很多，該題中涉及的是________________。

(4)目的基因能否在棉花植株體內穩定維持和表達其遺傳物質的關鍵是_____________。這需要通過檢測才能知道，檢測采用的方法是________________________________________。

Answer 1

【答案】 瓊脂 淀粉 C 攪拌 高壓蒸汽滅菌 稀釋 涂布分離 淀粉酶 擴大 可轉移至受體細胞并且整合到受體細胞染色體的DNA上 轉化 農桿菌轉化法 目的基因是否插入了受體細胞的染色體 DNA上 DNA分子雜交技術

【解析】試題分析：據圖分析：（一）①過程是梯度稀釋，②過程是稀釋涂布平板法接種，目的是篩選單菌落。從功能上看，Ⅰ號培養基屬于選擇培養基，從物理狀態上來說。Ⅱ號培養基屬于固體培養基。采用的接種方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法。常用的滅菌方法有高壓蒸汽滅菌、灼燒滅菌和干熱滅菌。（二）分析題圖：圖示為抗蟲棉的培育過程，首先獲取目的基因，構建基因表達載體；其次采用農桿菌轉化法將目的基因導入棉花細胞；最后采用植物組織培養技術將轉基因細胞培育成轉基因植株。

(一) (1)固體培養基，配置時常加入瓊脂作為凝固劑，選擇培養基其目的是篩選出高效產生高溫淀粉酶的嗜熱菌，所以僅以淀粉作為唯一的碳源。

(2)制備牛肉膏蛋白胨固體培養基的一般步驟是：計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板，故選C。

(3)融化過程，燒杯中加入瓊脂后要不停地攪拌，防止瓊脂糊底引起燒杯破裂。對培養基滅菌的方法一般為高壓蒸汽滅菌。

（4）圖中①過程是稀釋嗜熱菌培養液的過程，接種嗜熱菌即②過程常用稀釋涂布平板法。

(5)部分嗜熱菌在Ⅰ培養基上生長時可產生淀粉酶，分解培養基中的淀粉后會在菌落周圍形成透明圈，挑選相應的菌落，接種到Ⅱ號培養基進一步分離純化后，再對菌種進行擴大培養。

(二) （1）農桿菌中的Ti質粒上的T-DNA可轉移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上。

（2）Bt毒蛋白基因轉入普通棉株細胞內并成功實現了表達的過程，在基因工程中稱為轉化。

（3）由圖可知，題中將目的基因導入受體細胞的方法是農桿菌轉化法。

（4）目的基因是否插入到受體細胞染色體DNA上是目的基因能否在棉株體內穩定遺傳的關鍵。可通過DNA分子雜交技術進行檢測目的基因是否導入受體細胞。