Question

【題目】除草劑在現代農業生產中有廣泛的應用，有機農藥苯磺隆是其中之—，但是長期使用會污染環境。研究發現，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解，但對具體的微生物及其降解機制并不明確，為此，科研人員進行了相關實驗：

（1）實驗一:分離土壤中降解苯磺隆的菌株。

①微生物生長繁殖所需的主要營養物質有碳源、水、___________四類，選擇培養所用的培養基只能以苯磺隆作為唯一碳源，其原因是___________。

②純化菌株時，通常使用的劃線工具是___________。接種過程需在酒精燈火焰旁進行，其達到的目的是___________。劃線的某個平板培養后，第一劃線區域的劃線上都不間斷地長滿了菌，第二劃線區域所劃的第一條線上無菌落，其他劃線上有菌落。造成劃線無菌落可能的操作失誤有___________。

（2）實驗二：探究苯磺隆的降解機制。具體操作為：將該菌種的培養液過濾離心，取上清液做下圖所示實驗。

該實驗的假設是___________，該實驗設計是否合理？為什么？___________。

Answer 1

【答案】 氮源和無機鹽 只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長繁殖 接種環 防止外來微生物的污染 接種環灼燒后未冷卻；劃線未從第一區域末端開始 目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白質 不合理，缺少空白對照

【解析】【試題分析】

本題主要考查微生物的篩選與培養及相關實驗探究，要求考生識記培養基的成分、種類及作用；掌握分離微生物常用的兩種方法及操作過程；掌握探究實驗的原則，能結合圖中信息知識答題。

（1）①微生物生長繁殖所需的主要營養物質有碳源、水、氮源和無機鹽四類；選擇培養所用的培養基只能以苯磺隆作為唯一碳源，是因為只有能利用苯磺隆的微生物才能正常生長繁殖。

②純化菌株時，通常使用的劃線工具是接種環；為避免周圍環境中微生物的污染，接種過程需在酒精燈火焰旁進行，以達到防止外來微生物的污染的目的；平板劃線法要求灼熱的接種環冷卻后再劃線，否則會灼傷菌株甚至死亡。劃線時要從上一次劃線的末端開始劃線，這樣接種環上才有菌株。因此造成劃線無菌落可能的操作失誤有接種環灼燒后未冷卻；劃線未從第一區域末端開始。

（2）圖中實驗為將該菌種的培養液過濾離心，取上清液，加入蛋白酶處理后，測得其對苯磺隆的降解率，意為假設目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白質類酶，若用蛋白酶處理后，可使該酶分解，苯磺隆降解率下降，則假設成立。但由于缺少空白對照，不能比較蛋白酶處理后是否降低苯磺隆降解率，故該實驗設計不合理。