Question

【題目】RT－PCR是將RNA逆轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增反應(yīng)相結(jié)合的技術(shù)，可利用此技術(shù)獲取目的基因，具體過程如圖所示，以下說法錯(cuò)誤的是 (　 　)

A. 設(shè)計(jì)擴(kuò)增目的基因的引物時(shí)需考慮表達(dá)載體的序列

B. GC含量高的引物在與模板鏈結(jié)合時(shí)，需要更高的溫度

C. 過程Ⅰ需要加入緩沖液、原料、Taq酶和引物A等

D. 過程Ⅱ擬對(duì)單鏈cDNA進(jìn)行n次循環(huán)的擴(kuò)增，理論上需要2n－1個(gè)引物B

Answer 1

【答案】C

【解析】

1、設(shè)計(jì)引物時(shí)，引物應(yīng)當(dāng)可以與表達(dá)載體兩端的序列進(jìn)行互補(bǔ)配對(duì)

2、PCR原理：利用DNA雙鏈復(fù)制原理，將基因的核苷酸序列不斷地加以復(fù)制，使其數(shù)量呈指數(shù)方式增加。

利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的前提是，要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物，故A正確；GC對(duì)之間有三個(gè)氫鍵，GC含量高時(shí)穩(wěn)定性高，所以需要更高的溫度，故B正確；過程Ⅰ是逆轉(zhuǎn)錄過程，所以需要加入緩沖液、原料、逆轉(zhuǎn)錄酶酶和引物A等，故C錯(cuò)誤；過程Ⅱ擬對(duì)單鏈cDNA進(jìn)行n次循環(huán)的擴(kuò)增，根據(jù)DNA的半保留復(fù)制可知理論上需要2n－1個(gè)引物B，故D正確。