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【題目】下圖為DNA分子在不同酶作用下所發生的變化，圖中作用過程使用酶的順序是（）

A. 解旋酶、限制酶、DNA聚合酶、DNA連接酶

B. DNA連接酶、限制酶、DNA聚合酶、解旋酶

C. 限制酶、DNA連接酶、解旋酶、DNA聚合酶

D. DNA聚合酶、DNA連接酶、限制酶、解旋酶

【答案】C

【解析】本題考查目的基因的獲取、構建基因表達載體、DNA復制等過程，要求考生能理解上述過程的操作要點，正確區分限制酶、DNA連接酶、解旋酶及DNA聚合酶在相關過程中的作用。

分析圖形可知，①圖是利用限制酶切割DNA形成黏性末端，②圖是利用DNA連接酶將黏性末端連接起來，③圖是利用解旋酶使DNA解開雙鏈的過程，④圖是利用DNA聚合酶進行DNA復制的過程，所以C正確，ABD錯誤。

名稱	作用部位	作用底物	作用結果
限制酶	磷酸二酯鍵	DNA	將DNA切成兩個片段
DNA連接酶	磷酸二酯鍵	DNA片段	將兩個DNA片段連接為一個DNA分子
DNA聚合酶或熱穩定DNA聚合酶	磷酸二酯鍵	脫氧核苷酸	將單個脫氧核苷酸依次連接到單鏈末端
DNA (水解)酶	磷酸二酯鍵	DNA	將DNA片段水解為單個脫氧核苷酸
解旋酶	堿基對之間的氫鍵	DNA	將雙鏈DNA分子局部解旋為單鏈，形成兩條長鏈
RNA聚合酶	磷酸二酯鍵	核糖核苷酸	將單個核糖核苷酸依次連接到單鏈末端

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①利用無水乙醇可提取和分離色素，濾紙條上最終會有四條色素帶出現

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③從上往下數，濾紙條上第三條色素帶最寬，顏色為藍綠色

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A．①② B．①④ C．②③ D．③④

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（2）從胡蘿卜中提取胡蘿卜素的常用方法是__________，將提取的胡蘿卜素粗品通過__________方法進行鑒定。

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