Question

【題目】轉基因水稻“金色大米”可以幫助人們補充每天必需的維生素A．由于含有可以生成維生素A的β﹣胡蘿卜素，呈現金黃色澤，故稱“金色大米”． 培育流程如下，請據圖回答：
（已知限制酶I的識別序列和切點是 ；限制酶II的識別序列和切點是 ）
（1）圖中a、b所示獲得目的基因的方法是 ． 培育“金色大米”的基因工程操作四步曲中，其核心是 ．
（2）據圖分析，在構建c的過程中，目的基因用進行了切割．檢驗c導入能否成功需要利用作為標記基因．
（3）與轉入水稻不同，將c導入番茄細胞常用的方法是 ， 該方法依據的原理是番茄葉片受損后分泌的化合物的趨化性．檢測轉化成功的番茄植株，可采用技術檢測目的基因在番茄體內是否成功翻譯．
（4）若希望該轉基因水稻生產的“金色大米”含β﹣胡蘿卜素量更高、效果更好，則需要通過工程手段對合成β﹣胡蘿卜素的相關目的基因進行設計．

Answer 1

【答案】
（1）反轉錄法；基因表達載體的構建
（2）限制酶Ⅱ；基因I
（3）農桿菌轉化法；酚類；抗原﹣抗體雜交
（4）蛋白質
【解析】解：（1）圖中a表示轉錄過程，b表示逆轉錄，因此可以看出圖中a、b所示表示通過逆轉錄法獲得目的基因．（2）據圖分析，目的基因的兩側有﹣GGATCC﹣、﹣GATC﹣兩種序列，由于酶I的識別序列和切點是一G↓GATCC一酶II的識別序列和切點是一↓GATC﹣，因此只能選擇限制酶Ⅱ獲取目的基因．圖中可以看出目的基因插入到基因Ⅱ中，因此檢驗重組載體導入能否成功，需要利用基因I作為標記基因．（3）與轉入水稻不同，將基因表達載體導入番茄細胞常用的方法是農桿菌轉化法，該方法依據的原理是番茄葉片受損后分泌的酚類化合物的趨化性．檢測轉化成功的番茄植株，可采用抗原﹣抗體雜交技術檢測目的基因在番茄體內是否成功翻譯．（4）若希望該轉基因水稻生產的“金色大米”含維生素A含量更高、效果更好，則需要通過蛋白質工程手段對合成維生素A的相關目的基因進行設計．該工程是一項難度很大的工程，因為蛋白質的高級結構十分復雜，目前對很多蛋白質的高級結構還不了解，所以目前成功的例子不多． 所以答案是：（1）反轉錄法 基因表達載體的構建（2）限制酶Ⅱ 基因I（3）農桿菌轉化法 酚類 抗原﹣抗體雜交（4）蛋白質
【考點精析】解答此題的關鍵在于理解基因工程的原理及技術的相關知識，掌握基因工程的原理是利用DNA重組技術．