Question

【題目】科學家將人的生長激素基因與大腸桿菌的DNA分子進行重組，并成功地在大腸桿菌中得以表達，但在進行基因工程的操作過程中，需要同特點的限制酶切割目的基因和質粒，便于重組和篩選，已知限制酶Ⅰ的識別序列和切點是﹣G↓GATCC﹣，限制酶Ⅱ的識別序列和切點是﹣G↓GATC﹣，請據圖回答：

（1）過程①表示的是采取的方法來獲取目的基因．
（2）根據圖示分析，在構建基因表達載體過程中，應用限制酶切割質粒，用限制酶切割目的基因．用限制酶切割目的基因和運載體后形成的黏性末端通過原則進行連接．
（3）人的基因之所以能與大腸桿菌的DNA分子進行重組，原因是 ．
（4）人體的生長激素基因能在細菌體內成功表達是因為 ． 寫出目的基因在細菌中表達的過程 ．
（5）將得到的大腸桿菌B涂布在一個含有氨芐青霉素的培養基上，能夠生長的，（填能或不能）說明一定導入了重組質粒，因為 ．

Answer 1

【答案】
（1）反轉錄法（人工合成法）
（2）Ⅰ；Ⅱ；堿基互補配對
（3）人的基因與大腸桿菌DNA的雙螺旋結構相同
（4）共用一套（遺傳）密碼子；
（5）不能；如果導入普通質粒也能在含有安芐青霉素的培養基上生長
【解析】解：（1）過程①是以mRNA為模板形成基因的過程，屬于反轉錄，此過程需要逆轉錄酶的參與．（2）在構建基因表達載體時，需用限制酶對目的基因和質粒進行切割以形成相同的黏性末端．質粒如果用限制酶Ⅱ來切割的話，將會在質粒在出現兩個切口且抗生素抗性基因全被破壞，故質粒只能用限制酶Ⅰ切割（破壞四環素抗性而保留氨芐青霉素抗性，即將來形成的重組質粒能在含氨芐青霉素的培養基中生存，而在含四環素的培養基中不能生存）；目的基因兩端都出現黏性末端時才能和質粒發生重組，故目的基因只有用限制酶Ⅱ切割時，才會在兩端都出現黏性末端．黏性末端其實是被限制酶切開的DNA兩條單鏈的切口，這個切口上帶有幾個伸出的核苷酸，它們之間正好通過堿基互補配對進行連接．（3）來源不同的DNA之所以能發生重新組合，主要原因是兩者的結構基礎相同，都是雙螺旋結構，基本組成單位都是脫氧核苷酸等．（4）所有的生物都共用一套密碼子，所以人體的生長激素基因能在細菌體內成功表達，過程是生長激素基因→mRNA→生長激素．（5）因本題上有2個標記基因，但抗四環素基因被插入的目的基因破壞掉，因此剩下的是抗氨芐青霉素抗性基因，如果在含氨芐青霉素的培養基上能生長，說明已經導入了重組質粒或普通質粒A，因為普通質粒和重組質粒都含有抗氨芐青霉素的基因．
所以答案是：（1）反轉錄法（人工合成法）（2）Ⅰ；Ⅱ；堿基互補配對（3）人的基因與大腸桿菌DNA的雙螺旋結構相同（4）共用一套（遺傳）密碼子； （5）不能；如果導入普通質粒也能在含有安芐青霉素的培養基上生長
【考點精析】解答此題的關鍵在于理解基因工程的原理及技術的相關知識，掌握基因工程的原理是利用DNA重組技術．