Question

【題目】土壤中的苯酚(C6H5OH)對環境有極大的污染，科學家為了從土壤中分離出能專一性降解苯酚的微生物，進行了探究實驗。下圖是部分實驗過程，請據圖回答。

(1)為了分離純化目的菌種，①～④步驟的培養基中都加入了一定濃度的苯酚，該物質能為微生物提供碳源，除此之外，培養基中一般都還需要水、___________和___________等營養物質，還要滿足微生物生長對___________、特殊營養物質以及氧氣的要求。

(2)制備步驟④所需要的固體培養基，操作順序是：計算→稱量→______→_________倒平板。為了在步驟⑤的平板上形成單個的菌落，涂布平板前，需要對培養液進行多次稀釋，原因是______________________。

(3)研究人員想通過比較試管甲和乙中微生物的生長情況，證明分離出來的微生物只能以苯酚作為碳源，若甲試管中的液體培養基中的唯一碳源是苯酚，那么，乙試管中培養基成分與甲相比，區別是___________。研究人員對甲、乙兩只試管進行接種時，所選菌種都來自步驟⑤平板上的同一個單菌落，這樣做的目的是___________。

(4)當菌落長成后，將試管放入___________℃的冰箱中保藏。

Answer 1

【答案】氮源 無機鹽 PH（酸堿度） 溶化 滅菌 在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物易于分散成單個細胞 用其他碳源替代苯酚 保證甲，乙兩支試管中的微生物種類是相同的 4

【解析】

從土壤中分離出能專一性降解苯酚的微生物的實驗流程：土壤取樣→樣品的稀釋→將稀釋液涂布到以苯酚為唯一氨源的培養基上→挑選能生長的→鑒定。

(1)①～④步驟的培養基中苯酚可以為微生物提供碳源，此外培養基中還應該包括水、氮源和無機鹽等營養成分，還要滿足微生物生長對PH（酸堿度）、特殊營養物質以及氧氣的要求。

(2)制備固體培養基的操作順序為：計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。為了在步驟⑤的平板上形成單個的菌落，涂布平板前，需要對培養液進行多次稀釋，是因為在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物易于分散成單個細胞。

(3)甲乙試管是對照實驗，如果甲加入的是苯酚，則乙試管加入的是可以替代苯酚的其他碳源。研究人員對甲、乙兩只試管進行接種時，所選菌種都來自步驟⑤平板上的同一個單菌落，以保證甲，乙兩支試管中的微生物種類是相同的。

（4）保存菌種時，當菌落長成后，將試管放入4℃的冰箱中保藏。