Question

【題目】桑椹釀酒使用的多為葡萄酒酵母菌�，F(xiàn)科研人員從桑園中分離出發(fā)酵性能優(yōu)良的專用桑樵酒酵母菌E44，并用葡萄酒酵母菌（CK）做對(duì)照，對(duì)其相關(guān)性能進(jìn)行測(cè)定。分析回答下列問題：

（1）分離E44菌株的培養(yǎng)基一般需用______________滅菌，常用的分離方法是平板劃線法和______________。研究發(fā)現(xiàn)，釀酒酵母菌不能以賴氨酸作為氮源，因此可將分離獲得的酵母菌接種在____________________________的培養(yǎng)基上進(jìn)行鑒定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)菌株不能生長(zhǎng)。

（2）普遍認(rèn)為酵母菌的發(fā)酵能力與菌株對(duì)酒精的耐受性有關(guān)。為此，科研人員對(duì)E44菌株和CK菌株在不同酒精濃度下的死亡率進(jìn)行了測(cè)定，由實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷E44菌株的酒精耐受性更高，該結(jié)果的檢測(cè)過程中先用次甲基藍(lán)染色，再借助顯微鏡運(yùn)用______________法計(jì)數(shù)后，計(jì)算出各菌株的死亡率。次甲基藍(lán)可將死細(xì)胞染成藍(lán)色，而活細(xì)胞不著色，原因是____________________________。

（3）為進(jìn)一步確定E44菌株的發(fā)酵性能，科研人員分別測(cè)定并繪制了E44菌株和CK菌株的發(fā)酵性能曲線（如下圖）。由圖可知，第1d酵母菌降糖速率緩慢，酒精度增長(zhǎng)較慢的原因是______________________。從第2d開始，糖度迅速下降，酒精度也較快增長(zhǎng)的原因是____________________________。通過對(duì)比發(fā)現(xiàn)，E44菌株比CK菌株起酵快，發(fā)酵平穩(wěn)，是優(yōu)良的桑棋酒釀酒酵母菌種。

Answer 1

【答案】高壓蒸汽滅菌法 稀釋涂布平板法 以賴氨酸為唯一氮源 血細(xì)胞計(jì)數(shù)板（或顯微鏡直接計(jì)數(shù)） 細(xì)胞死亡，細(xì)胞膜不能控制物質(zhì)進(jìn)出（或失去選擇透過性） 酵母正處于增殖階段，以有氧呼吸為主，產(chǎn)生酒精較少 酵母菌進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生大量酒精

【解析】

分析題圖可知，第一天酵母菌降糖緩慢，酒精度增長(zhǎng)較慢，說明此時(shí)酵母菌正處于大量增殖階段，以有氧呼吸為主，產(chǎn)生酒精較少。從第二天開始糖度迅速下降，酒精度也較快增長(zhǎng)，進(jìn)入發(fā)酵階段，進(jìn)行無氧呼吸，產(chǎn)生大量酒精。第五天之后糖度和酒精度趨緩，進(jìn)入后發(fā)酵階段。

（1）培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基一般需要用高壓蒸汽滅菌法滅菌；常用的分離方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法；釀酒酵母不能以賴氨酸作為氮源，因此，可以將分離獲得的酵母菌接種在以賴氨酸為唯一氮源的培養(yǎng)基上進(jìn)行鑒定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)釀酒酵母不能生長(zhǎng)；

（2）統(tǒng)計(jì)細(xì)胞數(shù)量用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板；活細(xì)胞的細(xì)胞膜具有選擇透過性，用次甲基藍(lán)不能對(duì)活細(xì)胞染色，而能使死細(xì)胞染成藍(lán)色；

（3）從圖中可以看出，第1 d酵母菌降糖緩慢，酒精度增長(zhǎng)較慢，說明此時(shí)酵母菌正處于大量增殖階段，以有氧呼吸為主，產(chǎn)生酒精較少；從第2 d開始糖度迅速下降，酒精度也較快增長(zhǎng)，進(jìn)入發(fā)酵階段，進(jìn)行無氧呼吸，產(chǎn)生大量酒精。