Question

【題目】水稻 R 基因的等位基因 R1與 R2 存在一個堿基對的差異，為檢測水稻的基因型，使用存在 1 個堿基錯配的引物對 3 株水稻的 R 基因局部進行 PCR 擴增后，用限制酶 HinfⅠ切割并電泳（如下圖）。下列相關敘述錯誤的是（ ）

A.在 R1基因和 R2基因的差異序列中，不含限制酶 HinfⅠ的酶切位點

B.引物中存在 1 個堿基錯配，導致 R 基因經 PCR 擴增后 1 個堿基對改變

C.擴增后的R2片段有 1 個 HinfⅠ的酶切位點，而擴增后的 R1 片段沒有

D.電泳結果顯示，植株 1 為純合子，植株 2 和植株 3 為雜合子

Answer 1

【答案】D

【解析】

基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成。
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。
（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法。
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

A、由圖可知，在R1基因和R2基因的差異序列中，不含限制酶HinfⅠ的酶切位點，A正確；
B、因為引物中存在1個堿基錯配，導致R基因經PCR擴增后1個堿基對改變，B正確；
C、根據酶切結果可知，擴增后的R2片段有1個HinfⅠ的酶切位點，而擴增后的R1片段沒有HinfⅠ的酶切位點，C正確；
D、電泳結果顯示，植株1和植株2為純合子，植株3為雜合子，D錯誤。
故選D。