Question

【題目】回答下列有關動物細胞培養的問題：

（1）在動物細胞培養過程中，當貼壁細胞分裂生長到細胞表面________時，細胞會停止分裂增增殖，這種現象稱為細胞的________。此時，瓶壁上形成的細胞層數是________。要使貼壁細胞從瓶壁上分離下來，需要用酶處理，可用的酶是________。

（2）隨著細胞傳代次數的增多，絕大部分細胞分裂停止，進而出現________的現象；但極少數細胞可以連續增殖，其中有些細胞會因遺傳物質發生改變而變成________細胞，該種細胞的黏著性________，細胞膜表面糖蛋白的量________。

（3）現用某種大分子染料，對細胞進行染色時，觀察到死細胞被染色，而活細胞不染色，原因是________。

Answer 1

【答案】相互接觸 接觸抑制 單層（或一層） 胰蛋白酶 衰老甚至死亡 不死性 降低 減少 活細胞的膜具有選擇透過性，大分子染料不能進入活細胞內，故活細胞不能著色

【解析】

在動物細胞培養過程中，細胞會表現出接觸抑制現象，此時是單層細胞。用胰蛋白酶可以使貼壁細胞從瓶壁上分離開來。隨著細胞傳代培養代數的增多，絕大部分細胞分裂停止，進而出現衰老甚至死亡的現象，但極少數細胞可以連續增殖，有些細胞會因遺傳物質改變而變成不死性細胞。由于活細胞的膜具選擇透過性，大分子染料不能進入活細胞內，而死細胞的細胞膜喪失選擇透過性，大分子染料能夠進入死細胞內而著色。

（1）在動物細胞培養過程中，由于細胞有接觸抑制的特性，故當貼壁細胞分裂生長到細胞表面接觸時，細胞會停止分裂增增殖。此時，瓶壁上形成的細胞層數是單層（或一層）。若要使貼壁細胞從瓶壁上分離下來，通常需要用胰蛋白酶處理，使其分散成單細胞懸液。

（2）隨著細胞傳代次數的增多，絕大部分細胞分裂停止，并出現衰老甚至死亡的現象；但有極少數細胞可以連續增殖，其中有些細胞會因遺傳物質發生改變而變成不死性細胞，即相關基因發生基因突變成為癌細胞，該種細胞的細胞膜表面糖蛋白的量減少，進而導致細胞間黏著性降低，

（3）為了鑒別細胞的死活，可用某種大分子染料，對細胞進行染色時，由于細胞膜具有選擇透過性，故可根據細胞是否被染色來加以鑒別，通常死細胞由于細胞膜失去選擇透過性而被染色，而活細胞因為細胞膜的選擇透過性使得大分子染色劑無法進入細胞中而不被染色。