Question

【題目】如圖所示為血紅蛋白提取和分離的部分裝置，回答下列問(wèn)題。

（1）在進(jìn)行樣品處理時(shí)首先要對(duì)紅細(xì)胞進(jìn)行洗滌，目的是_______________。紅細(xì)胞破碎后，通過(guò)_________________法將血紅蛋白從混合液中分離出來(lái)，圖甲所示為分離結(jié)果。若紅細(xì)胞洗滌次數(shù)過(guò)少，則圖甲結(jié)果可能會(huì)_____________。

（2）圖乙裝置可用于_________過(guò)程。現(xiàn)有一定量的血紅蛋白溶液，進(jìn)行上述操作時(shí)若要盡快達(dá)到理想的實(shí)驗(yàn)效果，可以_____________________（寫出一種方法）。

（3）通過(guò)凝膠色譜法將樣品進(jìn)一步純化，最后經(jīng)SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定。凝膠色譜法是根據(jù)_________________分離蛋白質(zhì)的方法。加人SDS可以使蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率完全取決于_________________。

Answer 1

【答案】去除雜蛋白（血漿蛋白），以利于后續(xù)步驟的分離純化 低速短時(shí)間離心 分層不明顯 透析（粗分離） 增加緩沖液的量（或及時(shí)更換緩沖液） 相對(duì)分子質(zhì)量大小 分子的大小

【解析】

血紅蛋白的提取和分離流程為：紅細(xì)胞的洗滌→血紅蛋白的釋放→分離血紅蛋白溶液→透析→凝膠色譜柱的制作→凝膠色譜柱的裝填→樣品的加入和洗脫。

（1）洗滌紅細(xì)胞的目的是去除雜蛋白（血漿蛋白），以利于后續(xù)步驟的分離純化。紅細(xì)胞破碎后可以采用低速短時(shí)間離心的方法將血紅蛋白從混合液中分離出來(lái)。若紅細(xì)胞洗滌次數(shù)過(guò)少，血漿蛋白可能未被除凈，導(dǎo)致離心分層時(shí)各種成分分層不明顯。

（2）圖乙裝置可用于透析過(guò)程，若要盡快達(dá)到理想的實(shí)驗(yàn)效果，則可采用增加緩沖液的量或及時(shí)更換緩沖液的方法。

（3）①凝膠色譜法是根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的方法。②加入SDS可以使蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率完全取決于分子的大小。