Question

【題目】如圖是利用羊來生產人抗凝血酶（AT）的基本流程．圖中ampR表示氨芐青霉素抗性基因，如tetR表示四環素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ為三種限制酶及酶切位點．據圖回答問題：
（1）通過逆轉錄人工合成的AT基因（填“有”或“無”）內含子，可采用技術來擴增獲得的AT基因．
（2）圖中將人AT基因插入到質粒前，需要用限制酶同時切割載體和含AT基因的片段，篩選含有重組質粒的大腸桿菌首先需要在含的培養基上進行．
（3）重組質粒上啟動子的功能是 ． 過程①可采用的方法將重組質粒導入羊受精卵中，羊的早期胚胎發育至階段后通過過程②移植到代孕羊體內．
（4）可采用技術從分子水平來檢測AT基因是否表達成功．

Answer 1

【答案】
（1）無；PCR（多聚酶鏈式反應）
（2）HindⅢ和BamHI；氨芐青霉素
（3）驅動目的基因轉錄；顯微注射；桑椹胚或囊胚
（4）抗原一抗體雜交
【解析】解：（1）真核生物基因的編碼區包含外顯子和內含子，但是翻譯的模板mRNA只是由外顯子轉錄而來，因此通過逆轉錄人工合成的AT基因沒有內含子，可采用PCR（多聚酶鏈式反應）技術來擴增獲得的AT基因．（2）由于質粒中只含有兩種限制酶切點，因此圖中將人AT基因插入到質粒前，需要用HindⅢ和BamHI限制酶同時切割載體和含AT基因的片段；質粒中氨芐青霉素抗性基因作為標記基因，用于檢測目的基因是否導入受體細胞，因此篩選含有重組質粒的大腸桿菌首先需要在含氨芐青霉素的培養基上進行．（3）重組質粒上啟動子的功能是驅動目的基因轉錄．過程①可采用顯微注射的方法將重組質粒導入羊受精卵中，羊的早期胚胎發育至桑椹胚或囊胚階段后通過過程②移植到代孕羊體內．（4）可采用抗原一抗體雜交技術從分子水平來檢測AT基因是否表達成功． 所以答案是：（1）無 PCR（多聚酶鏈式反應）（2）HindⅢ和BamH I 氨芐青霉素 （3）驅動目的基因轉錄 顯微注射 桑椹胚或囊胚（4）抗原一抗體雜交
【考點精析】通過靈活運用基因工程的原理及技術，掌握基因工程的原理是利用DNA重組技術即可以解答此題．