Question

【題目】尿素是一種重要的農業肥料，需經細菌的分解才能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物種類和數量繁多，下列是從土壤中分離分解尿素細菌的有關問題，請分析回答：

（1）如圖是利用________法進行微生物接種，把聚集的菌種逐步稀釋到培養基的表面。除此方法外，常用的微生物接種方法還有________（寫一種）。

（2）如果要對培養的菌落進行純化，在培養基上劃線操作時，操作的第一步及每次劃線之前都要灼燒接種環，目的是對接種環進行________。

（3）下面是兩種培養基配方：

表1：A培養基配方

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4·7H2O	葡萄糖	尿素	瓊脂	H2O
1．4 g	2．1 g	0．2 g	10．0 g	1．0 g	15．0 g	1 000 mL

表2：B培養基配方

纖維素粉	NaNO3	Na2HPO4·7H2O	KH2PO4	MgSO4·7H2O	KCl	酵母浸膏	H2O
5 g	1 g	1．2 g	0．9 g	0．5 g	0．5 g	0．5 g	1 000 mL

①配制培養基的操作步驟________（用字母順序回答）。

a．倒平板

b．計算

c．溶化

d．稱量

e．滅菌

②通常培養基采用____________法滅菌。

③如果要分離土壤中能分解尿素的細菌，應選擇上述A配方的培養基，在該培養基中加入________指示劑，可初步鑒定出該種細菌能否分解尿素。

（4）如果進一步從尿素分解菌中提取出DNA，利用PCR技術擴增，則每次循環復制可分為________三步。而尿素分解菌能分解尿素的直接原因是它們能合成________。

Answer 1

【答案】（1）平板劃線 稀釋涂布平板法

（2）滅菌

（3）①bdcea ②高壓蒸汽滅菌 ③酚紅

（4）變性、復性、延伸 脲酶

【解析】（1）題圖中微生物的接種中使用了接種環，且是在固體培養基上接種，其接種方法是平板劃線法；除此方法外，常用的微生物接種方法還有稀釋涂布平板法。

（2）接種環通常用灼燒滅菌法。

（3）①配制培養基的操作步驟是：計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。

②培養基通常采用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌。

③如果要分離土壤中能分解尿素的細菌，應選擇上述以尿素為唯一氮源的A培養基，在該培養基中加入酚紅指示劑，可初步鑒定出該種細菌能否分解尿素。

（4）利用PCR技術擴增DNA的過程中，每次循環復制可分變性、復性好和延伸三步；尿素分解菌能分解尿素的直接原因是尿素分解菌能合成脲酶。