Question

【題目】大豆植株的DNA序列D能在基因A控制表達的轉移酶作用下，從序列原本所在染色體的某個位置轉移到其他位置，這種隨機轉移會導致突變。科研人員利用這一原理來構建穩定遺傳的大豆突變體庫，以獲得穩定遺傳的優良品種。

（1）科研人員分別將序列D和基因A作為_________，插入含卡那霉素抗性基因的農桿菌Ti質粒的_____上，利用轉化植物，篩選得到轉D植株和轉A植株。將重組Ti質粒導入土壤農桿菌中時，可以用______處理細菌細胞以增加____________。

（2）將獲得的外植體置于合適培養基中進行篩選，發生轉化的外植體通過____________形成愈傷組織，再通過___________產生不定芽和體細胞胚再長出整個植物。培養過程中，為便于清除代謝產物，防止細胞產物積累對細胞自身造成危害，應定期更換___________。

（3）若能夠在植物細胞中檢測到轉D和轉A基因，_________(填“能”或“不能”)說明該基因工程項目獲得成功。基因轉化是否成功應對大豆植物進行________水平鑒定，以確定該變異能否遺傳給后代。

Answer 1

【答案】 目的基因 T-DNA CaCl2 細胞壁的通透性 脫分化 再分化 培養液 不能 分子(或DNA)

【解析】分析題文描述可知：本題綜合考查學生對基因工程的基本操作程序、植物組織培養的過程，特別是將目的基因導入受體細胞、目的基因的檢測與鑒定等相關知識的識記和理解能力。

(1)依題意和圖示分析可知：序列D和基因A均為目的基因。在利用農桿菌轉化法將目的基因導入植物細胞之前，需將目的基因插入到農桿菌Ti質粒的T-DNA上，此時需用CaCl2或Ca2+處理，以增大土壤農桿菌細胞壁的通透性，使其成為感受態細胞。

(2)置于合適培養基中進行篩選而獲得的發生轉化的外植體，需借助植物組織培養技術才能將其培育成植物體，其過程是：發生轉化的外植體通過脫分化形成愈傷組織，再通過再分化產生不定芽和體細胞胚再長出整個植物。培養過程中應定期更換培養液，以便于清除代謝產物并防止細胞產物積累對細胞自身造成的危害。

(3) 若能夠在植物細胞中檢測到轉D和轉A基因，只能說明序列D和基因A成功導入并插入到受體細胞的DNA上，但不能說明序列D和基因A是否在受體細胞中成功表達，也就不能說明該基因工程項目獲得成功。基因轉化是否成功應對大豆植物進行分子(或DNA) 水平鑒定，以確定該變異能否遺傳給后代。